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上海纪宁酶联科技有限公司
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骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
12676 转铁蛋白(TRF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12677 密封蛋白(OCLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Occludin (OCLN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12678 丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12679 主要碱性蛋白(MBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12680 *-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12681 CD5抗原样蛋白(CD5L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for CD5 Antigen Like Protein (CD5L) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12682 骨成型蛋白10(BMP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12683 同种异体移植炎症因子1(AIF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12684 鞘氨醇1磷酸酯受体1(S1PR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1 (S1PR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12685 分拣蛋白1(SORT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sortilin 1 (SORT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12686 淀粉样蛋白β前体样蛋白2(APLP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Amyloid Beta Precursor Like Protein 2 (APLP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12687 钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Cardiac Muscle, Slow Twitch 2 (ATP2A2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12688 尿调蛋白(UMOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uromodulin (UMOD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12689 S100钙结合蛋白A8(S100A8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12690 S100钙结合蛋白A9(S100A9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A9 (S100A9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12691 蛋白Z依赖性蛋白酶抑制因子(ZPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12692 赖氨酰氧化酶(LOX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12693 胞裂蛋白6(SEPT6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Septin 6 (SEPT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12694 蛋氨酸腺苷转移酶Ⅱα(MAT2α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Methionine Adenosyltransferase II Alpha (MAT2a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12695 GPI锚定分子样蛋白(GML)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Anchored Molecule Like Protein (GML) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12696 B-细胞κ-轻肽基因增强子抑制因子激酶β(IκBKβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inhibitor Of Kappa-Light Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase Beta (IkBKb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12697 核糖体蛋白L23A(RPL23A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribosomal Protein L23A (RPL23A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12698 同线蛋白2(ST2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syntenin 2 (ST2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12699 Endoglin蛋白(ENG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endoglin (ENG) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12700 CD19分子(CD19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 19 (CD19) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12701 钾中间小电导钙激活通道蛋白亚家族N成员2(KCNN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Potassium Intermediate Small Conductance Calcium Activated Channel Subfamily N, Member 2 (KCNN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12702 白介素1家族成员9(IL1F9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12703 增殖关联蛋白2G4(PA2G4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proliferation Associated Protein 2G4 (PA2G4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12704 类固醇5α还原酶1(SRD5α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12705 膜联蛋白A4(ANXA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A4 (ANXA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12706 角蛋白9(KRT9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 9 (KRT9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12707 多功能蛋白聚糖(VS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Versican (VS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12708 密封蛋白(OCLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Occludin (OCLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12709 分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12710 运动因子相关蛋白1(MRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Motility Related Protein (MRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12711 骨成型蛋白3(BMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 3 (BMP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12712 非受体*激酶2(TNK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tyrosine Kinase, Non Receptor 2 (TNK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12713 封闭蛋白2(CLDN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Claudin 2 (CLDN2) 48T/96T Mus musculus骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 (Mouse)
12714 肌钯蛋白(MYPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myopalladin (MYPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12715 血管非炎性蛋白1(VNN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vanin 1 (VNN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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