山羊肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA试剂盒

山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

12510 快肌肌钙蛋白C(TNNC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin C Type 2, Fast (TNNC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12511 弹性蛋白(ELN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastin (ELN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12512 丙酮酸脱氢酶β(PDHβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12513 赖氨酸tRNA合成酶(KARS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysyl tRNA Synthetase (KARS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12514 赖氨酸tRNA合成酶(KARS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysyl tRNA Synthetase (KARS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12515 酮戊二酸脱氢酶(OGDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxoglutarate Dehydrogenase (OGDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12516 钙网蛋白(CRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calreticulin (CRT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12517 CD83分子(CD83)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 83 (CD83) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12518 组织蛋白酶B(CTSB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin B (CTSB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12519 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 2 (ENPP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12520 白介素18结合蛋白(IL18BP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 18 Binding Protein (IL18BP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12521 **脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12522 支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12523 白介素19(IL19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 19 (IL19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12524 花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-5-Lipoxygenase (ALOX5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12525 血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12526 细胞色素P450氧化还原酶(CPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytochrome P450 Reductase (CPR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12527 C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 3, Member B (CLEC3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12528 神经元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin II (NPTX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12529 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12530 促胰液素(SCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Secretin (SCT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12531 骨成型蛋白10(BMP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12532 自身免疫调节因子(AIRE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Autoimmune Regulator (AIRE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12533 5羟色胺转运蛋白(SERT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12534 组织蛋白酶G(CTSG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin G (CTSG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12535 补体成分9(C9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 9 (C9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12536 硬骨素(SOST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sclerostin (SOST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12537 葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Isomerase (GPI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12538 铁调素(Hepc)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12539 头蛋白(NOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Noggin (NOG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12540 神经肽FF(NPFF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide FF (NPFF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12541 肾连蛋白(NPNT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nephronectin (NPNT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12542 白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12543 髓细胞触发受体2(TREM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 2 (TREM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12544 泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12545 HtrA*肽酶1(HTRA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for HtrA Serine Peptidase 1 (HTRA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12546 肉毒碱乙酰转移酶(CRAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnitine Acetyltransferase (CRAT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12547 *肽酶抑制因子Kazal型1(SPINK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serine Peptidase Inhibitor Kazal Type 1 (SPINK1) 48T/96T Homo sapiens山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 (Human)
12548 钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpastatin (CAST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12549 脯氨酰4-羟化酶α多肽Ⅲ(P4Hα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III (P4Ha3) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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