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上海纪宁酶联科技有限公司
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山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
12391 骺蛋白聚糖(EPYC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epiphycan (EPYC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12392 生长激素2(GH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12393 次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12394 神经纤维网蛋白1(NRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropilin 1 (NRP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12395 线粒体解偶联蛋白2(UCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uncoupling Protein 2, Mitochondrial (UCP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12396 保护素(CD59)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protectin (CD59) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12397 吻素1(KISS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kisspeptin 1 (KISS1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12398 胰高血糖素样肽2(GLP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 2 (GLP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12399 Ⅰ型胶原α1(COL1α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 1 (COL1a1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12400 Ⅺ型胶原α1(COL11α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type XI Alpha 1 (COL11a1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12401 透明质酸结合蛋白2(HABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hyaluronan Binding Protein 2 (HABP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12402 癌胚抗原相关细胞粘附分子7(CEACAM7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 7 (CEACAM7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12403 纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen Like Protein 1 (FGL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12404 脂解激活脂蛋白受体(LSR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor (LSR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12405 *蛋白酶8(PRSS8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protease, Serine 8 (PRSS8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12406 桥粒芯胶粘蛋白1(DSC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Desmocollin 1 (DSC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12407 G蛋白偶联受体37(GPR37)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 37 (GPR37) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12408 转钴胺素蛋白Ⅰ(TCN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transcobalamin I (TCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12409 分层蛋白(SFN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stratifin (SFN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12410 游离甲状腺素(fT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Free Thyroxine (fT4) 48T/96T General
12411 *原片段F1+2(F1+2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12412 轻肽铁蛋白(FTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin, Light Polypeptide (FTL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12413 肌球蛋白ⅤA(MYO5A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin VA (MYO5A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12414 氨基乙二酸转氨酶(AADAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aminoadipate Aminotransferase (AADAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12415 兴奋性氨基酸转运蛋白2(EAAT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 2 (EAAT2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12416 钠/钾离子转运ATP酶α2肽(ATP1α2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Alpha 2 Polypeptide (ATP1a2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12417 钠/钾离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 1 Polypeptide (ATP1b1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12418 钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Plasma Membrane 2 (ATP2B2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12419 泛醌*还原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquinol Cytochrome C Reductase Core Protein II (UQCRC2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12420 RalA结合蛋白1(RALBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for RalA Binding Protein 1 (RALBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12421 肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (ARPC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12422 神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12423 神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12424 尿皮质素2(UCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12425 解整合素金属蛋白酶28(ADAM28)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 28 (ADAM28) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12426 尿皮质素3(UCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12427 半*蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystatin B (CSTB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12428 信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12429 肌肽酶1(CNDP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5山羊生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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