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上海纪宁酶联科技有限公司
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山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
12310 血管活性肠肽(VIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP) 48T/96T Chicken (Gallus)
12311 *1α(MEP1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Meprin A Alpha (MEP1a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12312 细胞程序性死亡蛋白1配体1(PDCD1LG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12313 丝蛋白Bβ(FLNβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Filamin B Beta (FLNb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12314 丝蛋白Cγ(FLNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Filamin C Gamma (FLNC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12315 肥大细胞类*1(CMA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12316 催产素受体(OXTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxytocin Receptor (OXTR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12317 肌球蛋白重链9(MYH9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle (MYH9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12318 肌球蛋白重链10(MYH10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle (MYH10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12319 泛醇*还原酶核心蛋白Ⅰ(UQCRC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquinol Cytochrome C Reductase Core Protein I (UQCRC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12320 生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12321 基质金属蛋白酶13(MMP13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12322 铁蛋白(FE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin (FE) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12323 铁调素(Hepc)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12324 胰高血糖素样肽1(GLP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 (GLP1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12325 成肌分化蛋白(MyoD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myogenic Differentiation (MyoD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12326 多配体蛋白聚糖1(SDC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12327 尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12328 Discoidin域受体家族成员1(DDR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Discoidin Domain Receptor Family, Member 1 (DDR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12329 微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein RP/EB Family, Member 1 (MAPRE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12330 骨形成蛋白15(BMP15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12331 补体受体4(CR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Receptor 4 (CR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12332 转醛缩酶(TALDO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transaldolase (TALDO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12333 成纤维细胞生长因子21(FGF21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12334 二肽基肽酶10(DPP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 10 (DPP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12335 穿孔素1(PRF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Perforin 1 (PRF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12336 骨膜蛋白(POSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Periostin (POSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12337 脑源性神经营养因子(BDNF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12338 雄烯酮(ADT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Androsterone (ADT) 48T/96T General
12339 α2-巨球蛋白(α2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12340 泛素结合酶E2A(UBE2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12341 Axis抑制蛋白2(AXIN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Axis Inhibition Protein 2 (AXIN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12342 端锚聚合酶1(TNKS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tankyrase 1 (TNKS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12343 端锚聚合酶2(TNKS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tankyrase 2 (TNKS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12344 肌纤蛋白(MYOC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myocilin (MYOC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12345 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 1A, Liver (CPT1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12346 叉头框蛋白A2(FOXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein A2 (FOXA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12347 回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal (FABP6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12348 白细胞关联免疫球蛋白样受体2(LAIR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2) 48T/96T Homo sapiens 山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒(Human)
12349 核仁素(NCL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleolin (NCL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5山羊P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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