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上海纪宁酶联科技有限公司
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山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
12268 阿黑皮素原(POMC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proopiomelanocortin (POMC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12269 *还原酶(GR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Reductase (GR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12270 内皮素受体A(ETRA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin Receptor A (ETRA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12271 妊娠相关血浆蛋白A2(PAPPA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pappalysin 2 (PAPPA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12272 补体成分5a(C5a)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12273 乳铁传递蛋白(LTF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12274 乳铁传递蛋白(LTF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12275 乳铁传递蛋白(LTF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
12276 髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12277 髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12278 蛋白C抑制因子(PCI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein C Inhibitor (PCI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12279 脯氨酰羧肽酶(PRCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolylcarboxypeptidase (PRCP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12280 衰老关键蛋白5(FBLN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibulin 5 (FBLN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12281 纤维蛋白原(FG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12282 牙本质涎磷蛋白(DSPP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dentin Sialophosphoprotein (DSPP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12283 神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Enolase, Neuron Specific (NSE) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12284 *结合球蛋白(CBG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12285 肿瘤坏死因子配体超家族成员12(TNFSF12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 12 (TNFSF12) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12286 补体3a(C3a)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3a (C3a) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12287 膜联蛋白A6(ANXA6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A6 (ANXA6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12288 跨膜*蛋白酶2(TMPRSS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 2 (TMPRSS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12289 畸胎瘤衍生生长因子1(TDGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1 (TDGF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12290 Ⅹ型胶原(COL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type X (COL10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12291 拓扑异构酶Ⅰ(*)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Topoisomerase I (*) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12292 *受体1(FOLR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12293 聚集蛋白聚糖(AGC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12294 B-细胞激活因子(BAFF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12295 细胞间粘附分子4(ICAM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 4 (ICAM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12296 阻抑素(PHB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prohibitin (PHB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12297 层粘连蛋白(LN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Laminin (LN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12298 Ⅲ型前胶原(PCⅢ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen III (PCIII) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12299 平足蛋白(PDPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Podoplanin (PDPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12300 前梯度蛋白2(AGR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12301 整合素αM(ITGαM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12302 存活素(Surv)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Survivin (Surv) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12303 Ⅸ型胶原α1(COL9α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type IX Alpha 1 (COL9a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12304 Ⅹ型胶原(COL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type X (COL10) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12305 Persephin蛋白(PSPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Persephin (PSPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12306 *(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Islet Cell Antibodies (ICA)山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12307 *Ⅷ(F8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor VIII (F8) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12308 甘露聚糖结合凝集素关联*蛋白酶1(MASP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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