鱼类*（Cortisol）ELISA试剂盒

鱼类*(Cortisol)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鱼类*(Cortisol)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

12106 血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 3 (VEGFR3) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12107 表面活性物质关联蛋白D(SPD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein D (SPD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12108 红细胞补体受体1(CR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Receptor 1, Erythrocyte (CR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12109 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer (EMMPRIN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12110 胃动素(MTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Motilin (MTL) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12111 纤维蛋白原(FG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12112 肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12113 脂联素受体2(ADIPOR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12114 氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12115 脂联素(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12116 组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 2 (HDAC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12117 血管紧张素Ⅲ(AngⅢ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin III (AngIII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12118 脊髓灰质炎病毒受体相关分子4(PVRL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Poliovirus Receptor Related Protein 4 (PVRL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12119 胞浆磷蛋白1(STMN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stathmin 1 (STMN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12120 松弛肽(RLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Relaxin (RLN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12121 抗乙酸*受体抗体(Anti-AChR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Acetylcholine Receptor Antibody (Anti-AChR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12122 Slit同源物1(Slit1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12123 Ⅰ型前胶原(PCⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen I (PCI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12124 Ⅲ型前胶原(PCⅢ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen III (PCIII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12125 摄食抑制因子1(NES1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12126 α白蛋白(AFM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Afamin (AFM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12127 催产素受体(OXTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxytocin Receptor (OXTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12128 热休克转录因子2(HSF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Transcription Factor 2 (HSF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12129 β2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-2-Microglobulin (b2M) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12130 *S转移酶ω1(GSTω1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Omega 1 (GSTo1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12131 C-型凝集素域家族4成员K(CLEC4K)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 4, Member K (CLEC4K) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12132 N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1(ASAH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (ASAH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12133 兜甲蛋白(LOR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Loricrin (LOR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12134 鞘脂激活蛋白原(PSAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prosaposin (PSAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12135 血管内皮生长因子121(VEGF121)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 121 (VEGF121) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12136 微粒体*S转移酶1(MGST1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12137 微粒体*S转移酶1(MGST1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12138 微粒体*S转移酶1(MGST1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12139 促甲状腺素(TSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12140 抵抗素(RETN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12141 多配体蛋白聚糖4(SDC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syndecan 4 (SDC4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12142 甲状腺结合球蛋白(TBG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroxine Binding Globulin (TBG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12143 基质Gla蛋白(MGP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Gla Protein (MGP) 48T/96T Rattus norvegicus鱼类*(Cortisol)ELISA试剂盒 (Rat)
12144 抑制素βE(INHβE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inhibin Beta E (INHbE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5鱼类*(Cortisol)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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