鱼孕激素/孕酮（PROG）ELISA试剂盒

鱼孕激素/孕酮（PROG）ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在鱼孕激素/孕酮（PROG）ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

11355 半乳凝素3(GAL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11356 半乳凝素3(GAL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11357 转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11358 转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11359 凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gelsolin (GS) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11360 Ki-67蛋白(Ki67P)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11361 脂多糖结合蛋白(LBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11362 细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11363 胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11364 头蛋白(NOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Noggin (NOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11365 载脂蛋白C1(APOC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein C1 (APOC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11366 10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11367 嗅素4(OLFM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11368 纤维介素蛋白(FGL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11369 *(SCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Salmon Calcitonin (SCT) 48T/96T General
11370 末端补体复合体C5b-9(C5b-9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11371 IgG-Fc片段低亲和力受体Ⅲb(FcγR3B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11372 硬骨素(SOST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sclerostin (SOST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11373 补体因子I(CFI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Factor I (CFI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11374 β-乳球蛋白(βLg)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11375 心肌型兰尼定受体2(RYR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 2, Cardiac (RYR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11376 血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11377 谷丙转氨酶(ALT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11378 前动力蛋白受体1(PKR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prokineticin Receptor 1 (PKR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11379 前动力蛋白受体1(PKR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prokineticin Receptor 1 (PKR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11380 丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11381 丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11382 基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11383 基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11384 胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11385 胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11386 胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11387 胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11388 基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11389 基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11390 基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11391 半乳凝素3(GAL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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