仓鼠甲状腺结合球蛋白（TBG）ELISA试剂盒

仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

11106 顶体蛋白(ACR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acrosin (ACR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11107 精子蛋白17(Sp17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sperm Protein 17 (Sp17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11108 转化生长因子β3(TGFβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11109 血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 (VEGFR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11110 Toll样受体7(TLR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 7 (TLR7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11111 Toll样受体7(TLR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 7 (TLR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11112 胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 4 (REG4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11113 组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone Acetyltransferase 1 (HAT1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11114 核因子κB激酶抑制因子相互作用蛋白(IκBIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inhibitor Of Nuclear Factor Kappa B Kinase Interacting Protein (IKBIP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11115 单氨氧化酶A(MAOA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monoamine Oxidase A (MAOA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11116 白介素17B(IL17B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17B (IL17B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11117 吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11118 丙酮酸脱氢酶α(PDHα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11119 *S转移酶α2(GSTα2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 2 (GSTa2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11120 中期因子(MK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Midkine (MK) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11121 胃泌素(GT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Gastrin (GT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11122 CD34分子(CD34)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 34 (CD34) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11123 CD34分子(CD34)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 34 (CD34) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11124 促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11125 超氧化物歧化酶1(SOD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11126 心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11127 心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11128 心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11129 发动蛋白1(DNM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dynamin 1 (DNM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11130 别孕烯醇酮(AP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Allopregnanolone (AP) 48T/96T General
11131 防御素β1(DEFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11132 三叶因子3(TFF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trefoil Factor 3, Intestinal (TFF3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11133 低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11134 高密度脂蛋白(HDL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for High Density Lipoprotein (HDL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11135 钙蛋白酶1(CAPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calpain 1, Large Subunit (CAPN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11136 花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arachidonate-5-Lipoxygenase (ALOX5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11137 ⅡD组磷脂酶A2(PLA2G2D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11138 胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Cytosolic (cPLA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11139 血幼素(HJV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hemojuvelin (HJV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11140 转甲状腺素蛋白(TTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transthyretin (TTR) 48T/96T 仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒Rattus norvegicus (Rat)
11141 白蛋白(ALB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Albumin (ALB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11142 组蛋白H3(H3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone H3 (H3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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