仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
11025 接触蛋白3(CNTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 3 (CNTN3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11026 细胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystathionine Gamma Lyase (CSE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11027 胰岛素降解酶(IDE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11028 氧鲨烯环化酶(OSC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxidosqualene Cyclase (OSC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11029 氧鲨烯环化酶(OSC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxidosqualene Cyclase (OSC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11030 α-乳清蛋白(αLA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Lactalbumin (aLA) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11031 泛素(Ub)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11032 白介素17(IL17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11033 垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 1, Pituitary (ADCYAP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11034 前胰淀粉样蛋白(ProIAPP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proislet Amyloid Polypeptide (ProIAPP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11035 干扰素γ诱导蛋白16(IFI16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma Inducible Protein 16 (IFI16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11036 Toll样受体4(TLR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11037 Toll样受体2(TLR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11038 激活素受体样激酶1(ALK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activin Receptor Like Kinase 1 (ALK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11039 心肌钙黏蛋白(CDHH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin, Heart (CDHH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11040 纤维胶凝蛋白3(FCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ficolin 3 (FCN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11041 柠檬酸合酶(CS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Citrate Synthase (CS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11042 血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycoprotein VI, Plaet (GP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11043 白介素7受体(IL7R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 7 Receptor (IL7R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11044 白介素28受体(IL28R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 28 Receptor (IL28R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11045 Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type II Collagen (CTXII) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11046 软骨寡聚基质蛋白(COMP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11047 纤维胶凝蛋白2(FCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ficolin 2 (FCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11048 聚集蛋白聚糖(AGC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11049 p53上调凋亡调节因子(PUMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for p53 Upregulated Modulator Of Apoptosis (PUMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11050 血小板亲和蛋白1(PKP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plakophilin 1 (PKP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11051 *7(KLK7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11052 S抗原(SAG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S Antigen (SAG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11053 蛋白激酶Cζ(PKCζ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11054 白介素5(IL5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11055 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4 (NOX4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11056 Smad同源物4(Smad4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 (Smad4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11057 趋化因子C-C-基元受体4(CCR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 4 (CCR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11058 血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11059 干扰素γ诱导单核因子(MIγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11060 蛋白激酶Cα(PKCα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11061 防御素α5(DEFα5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific (DEFa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11062 *(LZM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Chicken 仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒(Gallus)
11063 烟碱型*受体α4(CHRNα4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 4 (CHRNa4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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