豚鼠γ干扰素（IFN-γ）ELISA试剂盒

豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

10575 白血病抑制因子受体(LIFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor Receptor (LIFR) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10576 肾上腺素(EPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epinephrine (EPI) 48T/96T General
10577 表皮生长因子受体(EGFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10578 骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10579 骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10580 补体成分3(C3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 3 (C3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10581 单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10582 缓激肽(BK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bradykinin (BK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10583 干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10584 肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10585 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5 (NOX5) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10586 基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10587 甲状旁腺激素(PTH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone (PTH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10588 组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10589 脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
10590 碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10591 巨噬细胞炎性蛋白相关蛋白1(MRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein Related Protein 1 (MRP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10592 内皮型一氧化氮合酶(NOS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
10593 甲状腺素受体β(THRβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Hormone Receptor Beta (THRb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10594 血管细胞粘附分子1(VCAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10595 热休克蛋白β2(HSPβ2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2) 48T/96T Chicken (Gallus)
10596 免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10597 免疫球蛋白M(IgM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10598 内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10599 缓激肽(BK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Bradykinin (BK) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10600 髓鞘碱性蛋白(MBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10601 神经营养因子4(NT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 4 (NT4) 48T/96T Xenopus (Clawed frog)
10602 瘦素(LEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10603 抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Thyroid Microsome Antibody (ATMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10604 细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10605 细胞间粘附分子2(ICAM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10606 纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10607 内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10608 纤溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 2 (PAI2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10609 蛋白C(PROC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein C (PROC) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10610 血栓调节蛋白(TM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombomodulin (TM) 48T/96T Oryctolagus cuniculus 豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒(Rabbit)
10611 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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