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上海纪宁酶联科技有限公司
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豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
10492 氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10493 D-二聚体(D2D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for D-Dimer (D2D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10494 蛋白激酶D1(PRKD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase D1 (PKD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10495 铁蛋白(FE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin (FE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10496 淋巴细胞功能关联抗原2(LFA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lymphocyte Function Associated Antigen 2 (LFA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10497 组织因子(TF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tissue Factor (TF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10498 组织型纤溶酶原激活因子(tPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plasminogen Activator, Tissue (tPA) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10499 血栓调节蛋白(TM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombomodulin (TM) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
10500 血栓调节蛋白(TM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombomodulin (TM) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10501 纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10502 细胞间粘附分子3(ICAM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 3 (ICAM3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10503 细胞间粘附分子2(ICAM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10504 白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 48T/96T Chicken (Gallus)
10505 白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Chicken (Gallus)
10506 干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
10507 内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
10508 生长激素(GH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
10509 瘦素(LEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
10510 肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
10511 转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
10512 Ⅲ型胶原(COL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type III (COL3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10513 白介素10(IL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10514 白介素18(IL18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10515 白介素1β(IL1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10516 白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10517 白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10518 白介素6(IL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10519 白介素8(IL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10520 表皮生长因子(EGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epidermal Growth Factor (EGF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10521 促生长激素释放激素(GHRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10522 干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10523 基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10524 内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10525 脑钠素(BNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Brain Natriuretic Peptide (BNP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10526 生长激素(GH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10527 *(SST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Somatostatin (SST) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10528 瘦素(LEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒 (Pig)
10529 β-内啡肽(βEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-Endorphin (bEP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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