豚鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA试剂盒

豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

10245 L选择素(SELL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Selectin, Leukocyte (SELL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10246 L选择素(SELL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Selectin, Leukocyte (SELL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10247 单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10248 单核细胞趋化蛋白2(MCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10249 单核细胞趋化蛋白3(MCP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 3 (MCP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10250 巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 1, Macrophage (MCSF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10251 巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 1, Macrophage (MCSF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10252 巨噬细胞来源趋化因子(MDC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Macrophage Derived Chemokine (MDC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10253 基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10254 基质金属蛋白酶8(MMP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10255 胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Chicken (Gallus)
10256 胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10257 神经生长因子(NGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10258 神经生长因子(NGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10259 神经生长因子(NGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10260 神经营养因子3(NT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10261 神经营养因子3(NT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10262 神经营养因子3(NT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10263 神经营养因子4(NT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 4 (NT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10264 神经营养因子4(NT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 4 (NT4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10265 神经营养因子4(NT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurotrophin 4 (NT4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10266 骨保护素(OPG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10267 骨保护素(OPG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10268 肌肌酸激酶(CKM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) 48T/96T Chicken (Gallus)
10269 肌肌酸激酶(CKM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10270 抑瘤素M(OSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oncostatin M (OSM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10271 抑瘤素M(OSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oncostatin M (OSM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10272 核糖核酸酶T2(RNASET2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10273 核糖核酸酶T2(RNASET2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10274 胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Placenta Growth Factor (PLGF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10275 调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10276 CD30配体(CD30L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 30 Ligand (CD30L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10277 CD30配体(CD30L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 30 Ligand (CD30L) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10278 CD40配体(CD40L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10279 CD40配体(CD40L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10280 干细胞因子(SCF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10281 干细胞因子(SCF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10282 干细胞因子(SCF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Rattus norvegicus豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 (Rat)
10283 干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Stem Cell Factor Receptor (SCFR) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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