豚鼠转化生长因子β1（TGF-β1）ELISA试剂盒

豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

10207 白血病抑制因子(LIF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10208 抗SSA/Ro抗体(Anti-Ro)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-SSA/Ro Antibody (Anti-Ro) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10209 抗单链DNA抗体(Anti-ssDNA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Single Stranded DNA Antibody (Anti-ssDNA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10210 α-胞衬蛋白(SPTAN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fodrin (SPTAN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10211 嗜中性粒细胞胞浆因子2(NCF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 2 (NCF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10212 促甲状腺素(TSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10213 促甲状腺素(TSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10214 促甲状腺素(TSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10215 抗精子抗体(AsAb)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Sperm Antibody (AsAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10216 抗子宫内膜抗体(Anti-EMAb)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Endometrium Antibody (Anti-EMAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10217 脂联素(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10218 肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10219 表面活性物质关联蛋白A(SPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10220 转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10221 组胺(HIS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histamine (HIS) 48T/96T General
10222 内皮素1(EDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
10223 *2(VD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vitamin D2 (VD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10224 *3(VD3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vitamin D3 (VD3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10225 *12(VB12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vitamin B12 (VB12) 48T/96T General
10226 速激肽受体2(TACR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10227 速激肽受体2(TACR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10228 速激肽受体2(TACR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10229 肾损伤分子1(Kim1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10230 肾损伤分子1(Kim1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10231 肾损伤分子1(Kim1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10232 C-型钠尿肽(CNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10233 C-型钠尿肽(CNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10234 *(PP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pepsin (PP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10235 血小板衍生生长因子BB(PDGFBB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor BB (PDGFBB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10236 血小板衍生生长因子B(PDGFB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10237 表面活性物质关联蛋白J(SPJ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein J (SPJ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10238 50kDa核孔蛋白(NUP50)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 50kDa (NUP50) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10239 肌球蛋白轻链2(MYL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac (MYL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10240 抗甲基乙二醛抗体(AMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Methylglyoxal Antibody (AMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10241 辅肌动蛋白α3(ACTN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actinin Alpha 3 (ACTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10242 肌球蛋白轻链1(MYL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal (MYL1) 48T/96T Homo sapiens豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 (Human)
10243 肌球蛋白轻链激酶(MYLK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Light Chain Kinase (MYLK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10244 白血病抑制因子(LIF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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