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上海纪宁酶联科技有限公司
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豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
9898 血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 3 (ANGPTL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9899 白介素17B(IL17B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17B (IL17B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9900 WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for WAP Four Disulfide Core Domain Protein 1 (WFDC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9901 胰淀素(IAPP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Islet Amyloid Polypeptide (IAPP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9902 核糖核酸酶A3(RNASE3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A3 (RNASE3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9903 TATA盒结合蛋白(TBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TATA Binding Protein (TBP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9904 肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9905 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9906 髓分化因子88(MyD88)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloid Differentiation Factor 88 (MyD88) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9907 法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1 (FDFT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9908 T-细胞白血病/淋巴瘤蛋白1A(TCL1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for T-Cell Leukemia/Lymphoma Protein 1A (TCL1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9909 糖盏蛋白(GC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycocalicin (GC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9910 Kruppel样因子5(KLF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kruppel Like Factor 5, Intestinal (KLF5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9911 卷曲同源物8(FZD8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 8 (FZD8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9912 信号传导转录激活因子1(STAT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 1 (STAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9913 转化生长因子β3(TGFβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9914 蛋白激酶Bβ(PKBβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase B Beta (PKBb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9915 白介素2受体α(IL2Rα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Alpha (IL2Ra) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9916 丝裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 6 (MAP2K6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9917 血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2 (SGK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9918 表面活性物质关联蛋白D(SPD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein D (SPD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9919 吡哆醛激酶(PDXK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyridoxal Kinase (PDXK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9920 CD163分子(CD163)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9921 信号传导转录激活因子5B(STAT5B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 5B (STAT5B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9922 生长分化因子2(GDF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9923 癌蛋白诱导转录物3(OIT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oncoprotein Induced Transcript 3 (OIT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9924 B-细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 3 (Bcl3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9925 胱天蛋白酶4(CASP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 4 (CASP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9926 激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Inhibitor Of Activated STAT 1 (PIAS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9927 信号传导转录激活因子3(STAT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 3 (STAT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9928 泛素D(UBD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin D (UBD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9929 血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphofructokinase, Plaet (PFKP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9930 己糖激酶3(HK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexokinase 3, White Cell (HK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9931 色氨酰tRNA合成酶(WARS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tryptophanyl tRNA Synthetase (WARS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9932 二氢嘧啶酶样蛋白3(DPYSL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dihydropyrimidinase Like Protein 3 (DPYSL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9933 肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 13 (TNFSF13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9934 接触蛋白4(CNTN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 4 (CNTN4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9935 Ⅰ类主要组织相容性复合体E(MHCE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class I E (MHCE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9936 *受体相互作用蛋白1(GRIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutamate Receptor Interacting Protein 1 (GRIP1) 48T/96T Homo sapiens豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒 (Human)
9937 干扰素调节因子4(IRF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 4 (IRF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9938 表皮转*酶(TGM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transglutaminase 3, Epidermal (TGM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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