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上海纪宁酶联科技有限公司
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豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
9810 *(LZM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9811 干扰素β(IFNβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Chicken (Gallus)
9812 核糖核酸酶A3(RNASE3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A3 (RNASE3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9813 血管紧张素Ⅱ受体1(AGTR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9814 主要碱性蛋白(MBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9815 血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFcp)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Von Willebrand Factor Cleaving Protease (vWFCP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9816 激活素A受体Ⅰ(ACVR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activin A Receptor Type I (ACVR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9817 白介素6(IL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9818 白介素10(IL10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9819 干扰素γ(IFNγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9820 颗粒酶K(GZMK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme K (GZMK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9821 Ⅲ型前胶原羧基端原肽(PⅢCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen III C-Terminal Propeptide (PIIICP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9822 Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen II C-Terminal Propeptide (PIICP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9823 胰岛素样生长因子2受体(IGF2R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 Receptor (IGF2R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9824 组织内转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Latent Transforming Growth Factor Beta Binding Protein 2 (LTBP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9825 丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶3(MAPKAPK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Activated Protein Kinase 3 (MAPKAPK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9826 骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actin Alpha 1, Skeletal Muscle (ACTa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9827 葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose Transporter 3 (GLUT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9828 转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Stimulated Protein Clone 22 (TSC22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9829 前列腺素D合酶(PTGDS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prostaglandin D2 Synthase, Hematopoietic (PTGDS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9830 电子转移黄素蛋白β肽(ETFβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Electron Transfer Flavoprotein Beta Polypeptide (ETFb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9831 磷酸甘油酸变位酶2(PGAM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phosphoglycerate Mutase 2, Muscle (PGAM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9832 黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Melanoma Derived Leucine Zipper Extra Nuclear Factor (MLZE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9833 结蛋白(Des)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Desmin (Des) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9834 烟碱型*受体β1(CHRNβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Beta 1 (CHRNb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9835 心肌肌钙蛋白I(TNNI3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9836 低氧诱导因子1α(HIF1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9837 乳铁传递蛋白(LTF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
9838 钾氯协同转运蛋白4(KCC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Potassium Chloride Cotransporters 4 (KCC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9839 钾氯协同转运蛋白2(KCC2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Potassium Chloride Cotransporters 2 (KCC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9840 钾氯协同转运蛋白3(KCC3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Potassium Chloride Cotransporters 3 (KCC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9841 趋化因子C-C-基元受体7(CCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9842 β2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Beta-2-Microglobulin (b2M) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9843 三叶因子3(TFF3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trefoil Factor 3, Intestinal (TFF3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9844 肌肉生长抑制素(MSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myostatin (MSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9845 免疫球蛋白超家族成员16(IGSF16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin Superfamily, Member 16 (IGSF16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9846 红细胞生成素(EPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Erythropoietin (EPO) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9847 肌钙蛋白C(TNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin C (TNC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9848 连环蛋白β1(CTNNβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Catenin Beta 1 (CTNNb1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9849 乙酰*(A-CoA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acetyl Coenzyme A (A-CoA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9850 金属硫蛋白1(MT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1) 48T/96T Rattus norvegicus豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 (Rat)
9851 α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-2-Microglobulin Like Protein 1 (a2ML1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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