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上海纪宁酶联科技有限公司
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豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
9769 Toll样受体4(TLR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9770 肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9771 肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9772 肌球蛋白重链2(MYH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 2, Skeletal Muscle, Adult (MYH2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9773 肿瘤坏死因子受体超家族成员8(TNFRSF8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 8 (TNFRSF8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9774 蛋白激酶Cθ(PKCθ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Theta (PKCq) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9775 叉头框蛋白M1(FOXM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein M1 (FOXM1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9776 表皮生长因子受体(EGFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9777 *(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti Mullerian Hormone (AMH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9778 补体成分7(C7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 7 (C7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9779 补体C3转化酶(C3c)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement C3 Convertase (C3c) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9780 抑制素B(INHB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inhibin B (INHB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9781 C4结合蛋白β(C4BPβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C4 Binding Protein Beta (C4BPb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9782 基质金属蛋白酶11(MMP11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9783 解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9784 AMP激活蛋白激酶α1(PRKAα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1 (PRKAa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9785 叉头框蛋白P1(FOXP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein P1 (FOXP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9786 叉头框蛋白O1(FOXO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein O1 (FOXO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9787 叉头框蛋白C1(FOXC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein C1 (FOXC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9788 叉头框蛋白O3(FOXO3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein O3 (FOXO3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9789 CD14分子(CD14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 14 (CD14) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9790 棕榈酰化膜蛋白2(MPP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Membrane Protein, Palmitoylated 2 (MPP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9791 乙醇脱氢酶1(ADH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9792 颗粒酶K(GZMK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme K (GZMK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9793 血管生成素4(ANGPT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin 4 (ANGPT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9794 整合素αD(ITGαD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Integrin Alpha D (ITGaD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9795 脂多糖结合蛋白(LBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9796 血管生成素4(ANGPT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin 4 (ANGPT4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9797 血管生成素4(ANGPT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiopoietin 4 (ANGPT4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9798 心肌肌钙蛋白I(TNNI3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9799 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9800 CD6分子(CD6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 6 (CD6) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9801 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9802 心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9803 凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9804 凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9805 粘蛋白5B(MUC5B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 5 Subtype B (MUC5B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9806 催乳素(PRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolactin (PRL) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9807 蛋白*磷酸酶受体N(PTPRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N (PTPRN) 48T/96T Homo sapiens豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒 (Human)
9808 亲环素B(CYPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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