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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
8903 中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8904 胱天蛋白酶9(CASP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 9 (CASP9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8905 BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8906 BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8907 BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8908 胱天蛋白酶5(CASP5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase 5 (CASP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8909 趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8910 趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8911 趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8912 糖原合酶激酶3α(GSK3α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8913 糖原合酶激酶3α(GSK3α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8914 糖原合酶激酶3α(GSK3α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8915 B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
8916 丙酮酸脱氢酶α(PDHα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8917 丙酮酸脱氢酶α(PDHα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8918 己糖激酶1(HK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8919 己糖激酶1(HK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8920 己糖激酶1(HK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8921 Ⅳ型胶原(COL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8922 中期因子(MK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Midkine (MK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8923 胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
8924 同型半*(HA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Homocysteic Acid (HA) 48T/96T General
8925 细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
8926 *S转移酶α1(GSTα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8927 *S转移酶α1(GSTα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8928 *S转移酶α5(GSTα5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 5 (GSTa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8929 C-型钠尿肽(CNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8930 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8931 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8932 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8933 补体因子H(CFH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Factor H (CFH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8934 补体因子H(CFH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Factor H (CFH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8935 补体因子H(CFH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Factor H (CFH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8936 *原激活肽(TAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8937 *原激活肽(TAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8938 *原激活肽(TAP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8939 成纤维细胞生长因子7(FGF7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 7 (FGF7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8940 内脂素(VF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8941 内脂素(VF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8942 内脂素(VF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8943 11-去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 11-Dehydrothromboxane B2兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 (11-DH-TXB2) 48T/96T General
8944 12-羟基二十烷四烯酸(12-HETE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid (12-HETE) 48T/96T General
8945 雌酮(E1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Estrone (E1) 48T/96T General
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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