兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
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8816 核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 3, Group C, Member 1 (NR3C1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8817 氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8818 组蛋白H2B(H2B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone H2B (H2B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8819 Ⅳ型胶原(COL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8820 糖皮质激素受体α(GRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Alpha (GRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8821 糖皮质激素受体β(GRβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Beta (GRb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8822 1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 1,3-Bisphosphoglycerate (1,3-BPG) 48T/96T General
8823 高迁移率族蛋白17(HMG17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for High Mobility Group Protein 17 (HMG17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8824 胱天蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶(CAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Caspase Activated DNase (CAD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8825 蛋白二硫键异构酶(PDI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase (PDI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8826 70kDa热休克蛋白1样蛋白(HSPA1L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8827 泛素结合酶E2A(UBE2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8828 凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8829 多巴色素异构酶(DT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Dopachrome Tautomerase (DCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8830 YY肽(PYY)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peptide YY (PYY) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8831 多药耐药关联蛋白1(MRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Multidrug Resistance Associated Protein 1 (MRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8832 二磷酸腺苷(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adenosine Diphosphate (ADP) 48T/96T General
8833 类*(TPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tryptase (TPS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8834 胃泌素释放肽前体(ProGRP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pro Gastrin Releasing Peptide (ProGRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8835 强啡肽(Dyn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Big Dynorphin (Dyn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8836 160kDa核孔蛋白(NUP160)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 160kDa (NUP160) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8837 去唾液酸糖蛋白受体1(ASGPR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Asialoglycoprotein Receptor 1 (ASGR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8838 胎盘泌乳素(PL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Placental Lactogen (PL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8839 妊娠特异性β1-糖蛋白(PSG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 1 (PSG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8840 *(LZM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8841 胶质细胞成熟因子γ(MPFγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glia Maturation Factor Gamma (GMFg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8842 98kDa核孔蛋白(NUP98)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 98kDa (NUP98) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8843 软骨寡聚基质蛋白(COMP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8844 锌指同源框蛋白4(ZFHX4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8845 88kDa核孔蛋白(NUP88)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleoporin 88kDa (NUP88) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8846 精子特异性抗原2(SSFA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sperm Specific Antigen 2 (SSFA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8847 接触蛋白1(CNTN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Contactin 1 (CNTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8848 蛋白激酶Cζ(PKCζ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8849 巨肌酸激酶(MCK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Macro Creatine Kinase (MCK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8850 转录激活因子4(ATF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activating Transcription Factor 4 (ATF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8851 血管性血友病因子(vWF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8852 超氧化物歧化酶1(SOD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8853 髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8854 D-二聚体(D2D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for D-Dimer (D2D) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
8855 雌激素受体α(ERα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Estrogen Receptor Alpha (ERa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8856 TBP结合转录向下调节因子1(DR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Down Regulator Of Transcription 1, TBP Binding (DR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8857 脯氨酰羧肽酶(PRCP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Prolylcarboxypeptidase (PRCP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8858 中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) 48T/96T Homo sapiens兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒 (Human)
8859 组蛋白H2B(H2B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Histone H2B (H2B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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