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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
7656 大鼠增殖细胞抗原(PCNA) Rat PCNA ELISA Kit 96T/48T
7657 大鼠脂蛋白脂酶(LPL) Rat Lamina Propria Lymphocyte ELISA Kit 96T/48T
7658 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b) Rat tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit 96T/48T
7659 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 Rat Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide ELISA Kit 96T/48T
7660 大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GPII) Rat Glycogen phosphorylase II ELISA Kit 96T/48T
7661 大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GPMM) Rat Glycogen phosphorylase MM ELISA Kit 96T/48T
7662 大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB) Rat Glycogen phosphorylase BB ELISA Kit 96T/48T
7663 大鼠甲状腺素抗体(Thyroid Ab) Rat Thyroid Ab ELISA Kit 96T/48T
7664 大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb) Rat TRAb ELISA Kit 96T/48T
7665 大鼠儿茶酚胺(CA) Rat catecholamine ELISA Kit 96T/48T
7666 大鼠白介素23(IL-23) ELISA试剂盒 Rat Interleukin23 ELISA Kit 96T/48T
7667 大鼠心肌营养素1(CT-1) Rat cardiotrophln-l ELISA Kit 96T/48T
7668 大鼠alpha-Fodrin抗体IgG/IgA Rat anti-alpha-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit 96T/48T
7669 大鼠脂蛋白(Lpa) Rat Lpa ELISA Kit 96T/48T
7670 大鼠*VIII相关抗原(VIII-Ag) Rat VIII-Ag ELISA Kit 96T/48T
7671 大鼠血管性血友病因子(VWF) Rat VWF ELISA Kit 96T/48T
7672 大鼠*-抗*复合物(TAT) Rat TAT ELISA Kit 96T/48T
7673 大鼠抗*受体(ATR) Rat anti-thrombin receptor ELISA Kit 96T/48T
7674 大鼠*受体(TR) Rat thrombin receptor ELISA Kit 96T/48T
7675 大鼠心肌肌钙蛋白I(cTNI)ELISA试剂盒 Rat cardiac troponin I ELISA Kit 96T/48T
7676 大鼠磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K) Rat Phosphoinositide-3 kinase ELISA Kit 96T/48T
7677 大鼠蛋白激酶B(PKB) Rat protein kinase B ELISA Kit 96T/48T
7678 大鼠分泌型IgA(sIgA) Rat secretory IgA ELISA Kit 96T/48T
7679 大鼠血红素氧合酶2(HO-2) Rat heme oxygenase-2 ELISA Kit 96T/48T
7680 大鼠骨原交联(CrossLaps) Rat CrossLaps ELISA Kit 96T/48T
7681 大鼠I型腺原蛋白C末端前肽(CICP) Rat CICP ELISA Kit 96T/48T
7682 大鼠吡啶吩(PyriLinks) Rat PyriLinks ELISA Kit 96T/48T
7683 大鼠骨桥素(Osteocalcin) Rat Osteocalcin ELISA Kit 96T/48T
7684 大鼠骨特异性碱性磷酸酶(AlP-B)ELISA试剂盒 Rat Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit 96T/48T
7685 大鼠转铁蛋白受体(TFR) Rat transferrin receptor ELISA Kit 96T/48T
7686 大鼠胱抑素C(Cys C) Rat Cystatin C ELISA Kit 96T/48T
7687 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK) Rat Pyruvate Kinase M2 ELISA Kit 96T/48T
7688 大鼠乙酰*受体抗体(AChRab) Rat acetylcholine receptor antibody ELISA Kit 96T/48T
7689 大鼠γ氨基丁酸(GABA) Rat Gamma-aminobutyric acid ELISA Kit 96T/48T
7690 大鼠5-羟色氨(5-HT) Rat Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit 96T/48T
7691 大鼠P物质受体(SP-R) Rat substance P receptor ELISA Kit 96T/48T
7692 大鼠P物质(SP) Rat Substance P ELISA Kit 96T/48T
7693 大鼠血管活性肠肽(VIP) Rat Vasoactive Intestinal Peptide ELISA Kit 96T/48T
7694 大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒 Rat Thyroid-Peroxidase ELISA Kit 96T/48T
7695 大鼠α-L-岩藻糖苷酶(AFU) Rat α-L-fucosidasea useful ELISA Kit 96T/48T
7696 大鼠胰岛素原(PI) Rat Proinsulin ELISA Kit 96T/48T
7697 大鼠抗心肌抗体IgM(HRAb IgM) Rat HRAb IgM ELISA Kit 96T/48T
7698 大鼠抗心肌抗体IgG(HRAb IgG) Rat HRAb IgG ELISA Kit 96T/48T
7699 大鼠一氧化氮合成酶(NOS) Rat nitric oxide synthase ELISA KIT 96T/48T
7700 大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS) Rat inducible nitric oxide synthase ELISA KIT 96T/48T
7701 大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Rat Endothelial nitric oxide synthase ELISA Kit 96T/48T
7702 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA Kit Rat lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit 96T/48T
7703 大鼠热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒 Rat Heat Shock Protein 90 ELISA Kit 96T/48T
7704 大鼠热休克蛋白70(HSP70) Rat Heat Shock Protein 70 ELISA Kit 96T/48T
7705 大鼠热休克蛋白40(HSP40) Rat Heat Shock Protein 40 ELISA Kit 96T/48T
7706 大鼠热休克蛋白20(HSP20) Rat Heat Shock Protein 20 ELISA Kit 96T/48T
7707 大鼠β淀粉样蛋白1-40兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒(Aβ1-40) Rat Amyloid-β-Protein(1-40) ELISA Kit 96T/48T
7708 大鼠细胞周期素D3(Cyclin D3) Rat Cyclin D3 ELISA Kit 96T/48T
7709 大鼠细胞周期素D2(Cyclin D2) Rat Cyclin D2 ELISA Kit 96T/48T
7710 大鼠细胞周期素D1(Cyclin D1) Rat Cyclin D1 ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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