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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
7036 人NF-kB Human NF-kB ELISA Kit 96T/48T
7037 人晚期氧化蛋白(AOPP) Human AOPP ELISA Kit 96T/48T
7038 人不对称二甲基*(ADMA) Human ADMA ELISA Kit 96T/48T
7039 人BTC Human Betacellulin ELISA Kit 96T/48T
7040 人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA Kit Human Brain derived neurotrophic facor ELISA Kit 96T/48T
7041 人血管生成素-2(ANG-2) Human Angiopoietin-2 ELISA Kit 96T/48T
7042 人血管生成素-1(ANG-1) Human Angiopoietin-1 ELISA Kit 96T/48T
7043 人血管生长素(Angiogenin) Human Angiogenin ELISA Kit 96T/48T
7044 人角化细胞内分泌因子(AR) Human Amphiregulin ELISA Kit 96T/48T
7045 人血管紧张素II(ANG II) Human angiotension II ELISA Kit 96T/48T
7046 人血管紧张素I转化酶(ACE) Human Angiotensin I converting enzyme ELISA Kit 96T/48T
7047 人环-磷酸腺苷(cAMP) Human cAMP Elisa Kit 96T/48T
7048 人白细胞活化黏附因子(ALCAM) Human ALCAM Elisa Kit 96T/48T
7049 人活化素A(Activin A) Human Activin A ELISA Kit 96T/48T
7050 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 Human SOD ELISA Kit 96T/48T
7051 人肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA试剂盒 Human Glycoprotein96 ELISA Kit 96T/48T
7052 人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)ELISA试剂盒 Human HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
7053 人黑色素细胞抗体(melanocyte)ELISA试剂盒 Human anti-melanocyte ELISA Kit 96T/48T
7054 人组织蛋白去乙酰化酶(HD) Human Histone Deacetylase ELISA Kit 96T/48T
7055 人甲基化酶(Methylase) Human Methylase ELISA Kit 96T/48T
7056 人增殖细胞抗原(PCNA) Human PCNA ELISA Kit 96T/48T
7057 人磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K) Human Phosphoinositide-3 kinase ELISA Kit 96T/48T
7058 人蛋白激酶B(PKB) Human protein kinase B ELISA Kit 96T/48T
7059 人热休克蛋白90(HSP90)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 90 ELISA Kit 96T/48T
7060 人热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 70 ELISA Kit 96T/48T
7061 人热休克蛋白40(HSP40)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 40 ELISA Kit 96T/48T
7062 人热休克蛋白20(HSP20)ELISA试剂盒 Human Heat Shock Protein 20 ELISA Kit 96T/48T
7063 人细胞周期素D3(Cyclin D3) Human Cyclin D3 ELISA Kit 96T/48T
7064 人细胞周期素D2(Cyclin D2) Human Cyclin D2 ELISA Kit 96T/48T
7065 人细胞周期素D1(Cyclin D1) Human Cyclin D1 ELISA Kit 96T/48T
7066 人凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 Human Gelsolin ELISA Kit 96T/48T
7067 游离前列腺特异性抗原(FREE PSA) FREE PSA 96T/48T
7068 人前列腺特异性抗原(PSA) Human PSA ELISA Kit 96T/48T
7069 癌胚抗原(CEA) CEA 96T/48T
7070 人丙二醛(MDA)ELISA试剂盒 Human malondialchehyche ELISA Kit 96T/48T
7071 人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP) Huamn Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide ELISA Kit 96T/48T
7072 人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK) Human Pyruvate Kinase M2 ELISA Kit 96T/48T
7073 纤维连结蛋白 FN 96T/48T
7074 透明质酸 HA 96T/48T
7075 人层粘连蛋白 Laminin 96T/48T
7076 VI型胶原 Collagen VI 96T/48T
7077 IV型胶原 Collagen IV 96T/48T
7078 III型前胶原肽(N端) PIIINP 96T/48T
7079 III型前胶原肽(C端) PIIICP 96T/48T
7080 人III型胶原(Collagen)ELISA KIT Human Collagen Type III ELISA KIT 96T/48T
7081 I型胶原 Collagen I 96T/48T
7082 金属蛋白酶组织抑制因子-1 TIMP-1 96T/48T
7083 转移生长因子-β1 TGF-β1 96T/48T
7084 金属基质蛋白酶-1 MMP-1 96T/48T
7085 人干扰素α(IFNα) Human Interferon α ELISA Kit 96T/48T
7086 人内毒素(endotoxin) Human endotoxin ELISA Kit 96T/48T
7087 人内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3) Human Endothelial nitric oxide synthase 3(eNOS-3)ELISA Kit 兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒96T/48T
7088 人*(Cytochrome C) Human Cytochrome C ELISA Kit 96T/48T
7089 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 Human Lamina Propria Lymphocyte ELISA Kit 96T/48T
7090 人内皮型一氧化氮合成酶(eNOS) Human Endothelial nitric oxide synthase ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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