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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
6770 人白介素27(IL-27) human Interleukin27 ELISA Kit 96T/48T
6771 人白介素23(IL-23) Human Interleukin23 ELISA Kit 96T/48T
6772 人第八因子相关抗原(FVⅢAg) Human Factor VIII-related Antigen ELISA Kit 96T/48T
6773 人P53(P53) Human P53 ELISA Kit 96T/48T
6774 人环-磷鸟苷(cGMP) Human Cyclic guanosine monophosphate ELISA Kit 96T/48T
6775 人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒 Human Macrophage MigRation Inhibitory Factor ELISA Kit 96T/48T
6776 人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40) Human Amyloid-β-Protein(1-40) ELISA Kit 96T/48T
6777 人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒 Human Tissue factor pathway inhibitor ELISA Kit 96T/48T
6778 人心肌转录因子(GATA4) Human GATA4 ELISA Kit 96T/48T
6779 人干扰素诱导蛋白10(IP-10) Human IP-10 ELISA Kit 96T/48T
6780 人*肽(Glp-1) Human Glp-1 Elisa Kit 96T/48T
6781 人胆囊收缩素(cck)ELISA试剂盒 Human Cholecystokinin ELISA Kit 96T/48T
6782 人脑肠肽(Gehrelin) Human Gehrelin Elisa kit 96T/48T
6783 人磷脂酶A2(PLA2)ELISA试剂盒 Human Phospholipidase A2 ELISA Kit 96T/48T
6784 人6-酮-前列腺素(6-keto-prostaglandin) Human 6-keto-prostaglandin elisa kit 96T/48T
6785 人B细胞活化因子受体(BAFF-R) Human BAFF-R ELISA Kit 96T/48T
6786 人B细胞活化因子(BAFF) Human BAFF ELISA Kit 96T/48T
6787 人载脂蛋白A1(apoA1) Human apoA1 ELISA Kit 96T/48T
6788 人载脂蛋白B100(apoB100) Human apoB100 ELISA Kit 96T/48T
6789 人III型前胶原肽(PIIINP) Human PIIINP ELISA Kit 96T/48T
6790 人II型胶原(Collagen Type II)ELISA Kit Human Collagen Type II ELISA Kit 96T/48T
6791 人I型胶原(Collagen Type I) Human Collagen Type I ELISA Kit 96T/48T
6792 人I型前胶原羧基端肽(PICP) Human PICP ELISA Kit 96T/48T
6793 人可溶性sP-选择素(sP-selectin)ELISA Kit Human sP-selectin ELISA Kit 96T/48T
6794 人S100 ELISA Kit Human S100 ELISA Kit 96T/48T
6795 人S100B Human S100B ELISA Kit 96T/48T
6796 人白介素1(IL-1) Human IL-1 ELISA Kit 96T/48T
6797 人白介素-11(IL-11) Human IL-11 ELISA Kit 96T/48T
6798 人白介素-17(IL-17) Human IL-17 ELISA Kit 96T/48T
6799 人白介素1β (IL-1β) Human IL-1β ELISA Kit 96T/48T
6800 人白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 Human LTB4 ELISA Kit 96T/48T
6801 人白血病抑制因子受体(LIFR) Human LIFR ELISA Kit 96T/48T
6802 人表皮生长因子(EGF) Human EGF ELISA Kit 96T/48T
6803 人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 Human iFABP ELISA Kit 96T/48T
6804 人端粒酶(omerase) Human omerase ELISA Kit 96T/48T
6805 人肌钙蛋白-T(Tn-T) Human Tn-T ELISA Kit 96T/48T
6806 人基质金属蛋白酶5(MMP-5) Human MMP-5 ELISA Kit 96T/48T
6807 人基质金属蛋白酶4(MMP-4) Human MMP-4 ELISA Kit 96T/48T
6808 人基质金属蛋白酶-9(MMP-9) ELISA试剂盒 Human MMP-9 ELISA Kit 96T/48T
6809 人基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1) Human TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
6810 人碱性成纤维生长因子(bFGF) Human bFGF ELISA Kit 96T/48T
6811 人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒 Human AGRP ELISA Kit 96T/48T
6812 人巨噬细胞炎症蛋白-5(MIP-5) Human MIP-5 ELISA Kit 96T/48T
6813 人可溶性E-选择素(sE-selectin[CD-62E]) Human sE-selectin[CD-62E] ELISA Kit 96T/48T
6814 人可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1) ELISA试剂盒 Human sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
6815 人可溶性血管细胞粘附分子(sVCAM-1) Human sVCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
6816 *A(IgA) Human IgA ELISA Kit 96T/48T
6817 *E(IgE) Human IgE兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 ELISA Kit 96T/48T
6818 *G(IgG)ELISA试剂盒 Human IgG ELISA Kit 96T/48T
6819 *M(IgM)ELISA试剂盒 Human IgM ELISA Kit 96T/48T
6820 人内皮抑素(Endostatin) ELISA试剂盒 Human Endostatin ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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