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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
6379 人转移因子(TF)ELISA Kit,48T/96T
6380 人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA Kit,48T/96T
6381 人胃粘液素(GM)ELISA Kit,48T/96T
6382 人溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA Kit,48T/96T
6383 小鼠溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA Kit,48T/96T
6384 大鼠溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA Kit,48T/96T
6385 人弹性蛋白(Elastin)ELISA Kit,48T/96T
6386 人肌球蛋白重链(MHC)ELISA Kit,48T/96T
6387 人心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)ELISA Kit,48T/96T
6388 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA Kit,48T/96T
6389 人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA Kit,48T/96T
6390 人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA Kit,48T/96T
6391 人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA Kit,48T/96T
6392 猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA Kit,48T/96T
6393 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA Kit,48T/96T
6394 人钙离子通道抗体(VGCC)ELISA Kit,48T/96T
6395 人抗鼠抗体(HAMA)ELISA Kit,48T/96T
6396 人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA Kit,48T/96T
6397 人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA Kit,48T/96T
6398 人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA Kit,48T/96T
6399 人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA Kit,48T/96T
6400 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA Kit,48T/96T
6401 人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA Kit,48T/96T
6402 人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA Kit,48T/96T
6403 人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)ELISA Kit,48T/96T
6404 人芳香烃受体(AhR)ELISA Kit,48T/96T
6405 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA Kit,48T/96T
6406 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA Kit,48T/96T
6407 人细胞外信号调节激酶(ERK)ELISA Kit,48T/96T
6408 人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA Kit,48T/96T
6409 人血凝素(HA)ELISA Kit,48T/96T
6410 人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA Kit,48T/96T
6411 人毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM)ELISA Kit,48T/96T
6412 人*加压素(AVP)ELISA Kit,48T/96T
6413 人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA Kit,48T/96T
6414 人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA Kit,48T/96T
6415 人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA Kit,48T/96T
6416 人血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA Kit,48T/96T
6417 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA Kit,48T/96T
6418 人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)
6419 猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)
6420 人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA Kit,48T/96T
6421 猪黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA Kit,48T/96T
6422 人肿瘤特异性抗原(TSA) ELISA Kit,48T/96T
6423 人乳酸脱氢酶(LDH) ELISA Kit,48T/96T
6424 人醛缩酶(ALD)ELISA Kit,48T/96T
6425 人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)ELISA Kit,48T/96T
6426 大鼠β-防御素(β-Defensins)ELISA Kit,48T/96T
6427 人C多肽(CP) ELISA Kit,48T/96T
6428 人γ谷氨酰转移酶(GGT) ELISA Kit,48T/96T
6429 人癌胚铁蛋白(CEF) ELISA Kit,兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒48T/96T
6430 人本周蛋白(BJP) ELISA Kit,48T/96T
6431 人变肾上腺素(MN) ELISA Kit,48T/96T
6432 人垂草扁桃酸(VMA) ELISA Kit,48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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