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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
6214 人脑啡肽(ENK)ELISA Kit,48T/96T
6215 人低分子质量蛋白7(LMP7/PSMB9)ELISA Kit,48T/96T
6216 人黏着斑激酶(FAK)ELISA Kit,48T/96T
6217 人尿蛋白(UP)ELISA Kit,48T/96T
6218 人凝聚素(CLU)ELISA Kit,48T/96T
6219 人抗原处理相关转运蛋白(TAP)ELISA Kit,48T/96T
6220 人溶血补体(Hc)ELISA Kit,48T/96T
6221 人*血栓调节蛋白复合物(T-TM)ELISA Kit,48T/96T
6222 人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)ELISA Kit,48T/96T
6223 人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA Kit,48T/96T
6224 人胃泌素释放肽前体(ProGRP)ELISA Kit,48T/96T
6225 人强啡肽(Dyn)ELISA Kit,48T/96T
6226 人羟*糖蛋白(HRGP)ELISA Kit,48T/96T
6227 人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)ELISA Kit,48T/96T
6228 人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
6229 人胎盘泌乳素(PL)ELISA Kit,48T/96T
6230 人妊娠特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA Kit,48T/96T
6231 人*(LZM)ELISA Kit,48T/96T
6232 人肽-MHC复合物(pMHC)ELISA Kit,48T/96T
6233 人成熟促进因子(MPF)ELISA Kit,48T/96T
6234 *轻链lambda(λ-IgLC)ELISA Kit,48T/96T
6235 人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA Kit,48T/96T
6236 人上皮膜抗原(EMA)ELISA Kit,48T/96T
6237 人伤寒抗原(St-Ag)ELISA Kit,48T/96T
6238 人上皮特异性抗原(ESA)ELISA Kit,48T/96T
6239 人神经保护因子(CVNPF)ELISA Kit,48T/96T
6240 人神经激肽B(NKB)ELISA Kit,48T/96T
6241 人神经降压素(NT)ELISA Kit,48T/96T
6242 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA Kit,48T/96T
6243 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA Kit,48T/96T
6244 人丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA Kit,48T/96T
6245 人*(FK506)ELISA Kit,48T/96T
6246 人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA Kit,48T/96T
6247 人*结合蛋白(RBP)ELISA Kit,48T/96T
6248 小鼠*结合蛋白(RBP)ELISA Kit,48T/96T
6249 人生长调节致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA Kit,48T/96T
6250 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA Kit,48T/96T
6251 人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA Kit,48T/96T
6252 人受体*激酶(RTKs)ELISA Kit,48T/96T
6253 人天*氨基转移酶(AST)ELISA Kit,48T/96T
6254 人水蛭素(Hirudin)ELISA Kit,48T/96T
6255 人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA Kit,48T/96T
6256 人透明质酸酶(HAase)ELISA Kit,48T/96T
6257 植物激素脱落酸(ABA)ELISA Kit,48T/96T
6258 人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)ELISA Kit,48T/96T
6259 人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA Kit,48T/96T
6260 人糖链抗原19-9(CA19-9)ELISA Kit,48T/96T
6261 人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA Kit,48T/96T
6262 人抗补体1q抗体(C1q)ELISA Kit,48T/96T
6263 人胃泌素(Gastrin)ELISA Kit,兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒48T/96T
6264 人复制蛋白A(RPA-70)ELISA Kit,48T/96T
6265 人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA Kit,48T/96T
6266 人胃抑素(GIP)ELISA Kit,48T/96T
6267 人细胞毒素(CTX)ELISA Kit,48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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