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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
6161 人钙调结合蛋白(CALD)ELISA Kit,48T/96T
6162 人细胞分裂周期基因(CDC)ELISA Kit,48T/96T
6163 人神经丝蛋白(NF)ELISA Kit,48T/96T
6164 人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA Kit,48T/96T
6165 人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA Kit,48T/96T
6166 人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA Kit,48T/96T
6167 人黑色素瘤相关抗原(MAGE)ELISA Kit,48T/96T
6168 人套膜蛋白(iNV)ELISA Kit,48T/96T
6169 人*脱羧酶(ODC)ELISA Kit,48T/96T
6170 人转移因子(TF)ELISA Kit,48T/96T
6171 人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA Kit,48T/96T
6172 人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA Kit,48T/96T
6173 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA Kit,48T/96T
6174 人抗利尿激素/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA Kit,48T/96T
6175 小鼠抗利尿激素/*加压素(ADH/AVP)ELISA Kit,48T/96T
6176 人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA Kit,48T/96T
6177 人抗透明带抗体(aZP)ELISA Kit,48T/96T
6178 人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA Kit,48T/96T
6179 人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)ELISA Kit,48T/96T
6180 人胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)ELISA Kit,48T/96T
6181 人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA Kit,48T/96T
6182 人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA Kit,48T/96T
6183 人副肿瘤性天疱疮抗体(PNP)ELISA Kit,48T/96T
6184 人*甲状腺刺激素(LATS)ELISA Kit,48T/96T
6185 人OJ抗体(OJ/IleRS)ELISA Kit,48T/96T
6186 人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA Kit,48T/96T
6187 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA Kit,48T/96T
6188 人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA Kit,48T/96T
6189 人可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA Kit,48T/96T
6190 兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA Kit,48T/96T
6191 人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA Kit,48T/96T
6192 人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)ELISA Kit,48T/96T
6193 人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA Kit,48T/96T
6194 人结肠癌抗原(CCA)ELISA Kit,48T/96T
6195 小鼠结肠癌抗原(CCA)ELISA Kit,48T/96T
6196 人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA Kit,48T/96T
6197 人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA Kit,48T/96T
6198 人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA Kit,48T/96T
6199 人莱姆IgG(Lyme-IgG)ELISA Kit,48T/96T
6200 人痢疾内阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T
6201 人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA Kit,48T/96T
6202 人发动蛋白(DNM2)ELISA Kit,48T/96T
6203 人狼疮抗凝抗体(LAC/LA)ELISA Kit,48T/96T
6204 人抗流行性出血热病毒抗体IgG (EHF)ELISA Kit,48T/96T
6205 人流行性腮腺炎(EP)ELISA Kit,48T/96T
6206 人雄激素结合蛋白(ABP)ELISA Kit,48T/96T
6207 人硫酸褪黑色素(MS)ELISA Kit,48T/96T
6208 人麻疹病毒(MV)ELISA Kit,兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒48T/96T
6209 人麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA Kit,48T/96T
6210 人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA Kit,48T/96T
6211 人抗内因子抗体(IFA)ELISA Kit,48T/96T
6212 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA Kit,48T/96T
6213 人T细胞受体(TCR)ELISA Kit,48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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