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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
5884 猪低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA Kit,48T/96T
5885 大鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)ELISA Kit,48T/96T
5886 人流感病毒A(FLU A)ELISA Kit,48T/96T
5887 人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA Kit,48T/96T
5888 人瘦素受体(LEPR)ELISA Kit,48T/96T
5889 人可溶性肿瘤坏死因子受体1(sTNF-R1)ELISA Kit,48T/96T
5890 人可溶性肿瘤坏死因子受体2(sTNF-R2)ELISA Kit,48T/96T
5891 人α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP)ELISA Kit,48T/96T
5892 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)ELISA Kit,48T/96T
5893 人磷酸化乙酰*(PaCoA)ELISA Kit,48T/96T
5894 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA Kit,48T/96T
5895 人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)ELISA Kit,48T/96T
5896 人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA Kit,48T/96T
5897 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA Kit,48T/96T
5898 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA Kit,48T/96T
5899 大鼠总胆汁酸(TBA)ELISA Kit,48T/96T
5900 大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA Kit,48T/96T
5901 人蛋白(肽酰脯氨酰顺/反异构酶)NIMA结合1(PIN1)ELISA Kit,48T/96T
5902 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA Kit,48T/96T
5903 大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA Kit,48T/96T
5904 大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA Kit,48T/96T
5905 猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV)ELISA Kit,48T/96T
5906 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶(pACCase)ELISA Kit,48T/96T
5907 人抗突触前膜抗体(PsmAb)ELISA Kit,48T/96T
5908 猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)ELISA Kit,48T/96T
5909 人抗肌联蛋白抗体(TTN)ELISA Kit,48T/96T
5910 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA Kit,48T/96T
5911 猪白介素12(IL-12/P40)ELISA Kit,48T/96T
5912 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA Kit,48T/96T
5913 人*1(KLK 1)ELISA Kit,48T/96T
5914 大鼠孕酮受体(PGR)ELISA Kit,48T/96T
5915 蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)ELISA Kit,48T/96T
5916 小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit,48T/96T ,
5917 猫汉赛巴通体(CBH)ELISA Kit,48T/96T
5918 人可溶性CD146分子(sCD146)ELISA Kit,48T/96T
5919 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA Kit,48T/96T
5920 大鼠*释放激素受体(GnRHR)ELISA Kit,48T/96T
5921 大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)ELISA Kit,48T/96T
5922 小鼠乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA Kit,48T/96T
5923 猴子乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA Kit,48T/96T
5924 猪乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA Kit,48T/96T
5925 大鼠乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA Kit,48T/96T
5926 兔乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA Kit,48T/96T
5927 犬*1(VK1)ELISA Kit,48T/96T
5928 人*1(VK1)ELISA Kit,48T/96T
5929 小鼠*1(VK1)ELISA Kit,48T/96T
5930 植物*1(VK1)ELISA Kit,48T/96T
5931 大鼠*1(VK1)ELISA Kit,48T/96T
5932 犬组胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T
5933 豚鼠组胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T
5934 人组胺(HIS)ELISA Kit,兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒48T/96T
5935 小鼠组胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T
5936 猪组胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T
5937 大鼠组胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T
5938 兔子组胺(HIS)ELISA Kit,48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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