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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
5438 人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)ELISA Kit,48T/96T
5439 人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5440 小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5441 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5442 大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T
5443 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA Kit,48T/96T
5444 犬肌红蛋白(MYO/MB) ELISA Kit,48T/96T
5445 鸡肌红蛋白(MYO/MB) ELISA Kit,48T/96T
5446 人肌红蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T
5447 小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T
5448 大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T
5449 人迟现抗原(VLA)ELISA Kit,48T/96T
5450 大鼠迟现抗原(VLA)ELISA Kit,48T/96T
5451 犬内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5452 骆驼内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5453 豚鼠内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5454 人内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5455 小鼠内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5456 猴子内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5457 猪内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5458 大鼠内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5459 兔子内皮素1(ET-1)ELISA Kit,48T/96T
5460 人大内皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
5461 小鼠大内皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
5462 大鼠大内皮素(Big ET)ELISA Kit,48T/96T
5463 人前心钠肽(Pro-ANP)ELISA Kit,48T/96T
5464 小鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA Kit,48T/96T
5465 大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA Kit,48T/96T
5466 人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA Kit,48T/96T
5467 小鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA Kit,48T/96T
5468 大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA Kit,48T/96T
5469 人抗类风湿关节炎核抗原抗体(RANA)ELISA Kit,48T/96T
5470
5471 人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA Kit,48T/96T
5472 人抗磷壁酸抗体(TA)ELISA Kit,48T/96T
5473 人抗磷脂酰*抗体(APSA)ELISA Kit,48T/96T
5474 人不耐热肠毒素B亚单位(LTB)ELISA Kit,48T/96T
5475 人抗流行性出血热病毒抗体IgM (EHF)ELISA Kit,48T/96T
5476 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)ELISA Kit,48T/96T
5477 人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA Kit,48T/96T
5478 兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA Kit,48T/96T
5479 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA Kit,48T/96T
5480 人抗染色体抗体(anti-chromosome Ab)ELISA Kit,48T/96T
5481 人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)ELISA Kit,48T/96T
5482 人抗人绒毛膜*抗体(AhCGAb)ELISA Kit,48T/96T
5483 人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)ELISA Kit,48T/96T
5484 人抗腮腺管抗体(anti-parotid duct Ab)ELISA Kit,48T/96T
5485 人抗肾上腺皮质抗体(AAA)ELISA Kit,48T/96T
5486 人单纯疱疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA Kit,48T/96T
5487 人抗生长激素抗体(GHAb)ELISA Kit,48T/96T
5488 人抗髓磷脂抗体IgA(anti-myelin Ab)ELISA Kit,48T/96T
5489 人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA Kit,48T/96T
5490 人D二聚体(D2D)ELISA Kit,兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒48T/96T
5491 猪D二聚体(D2D)ELISA Kit,48T/96T
5492 兔子D二聚体(D2D)ELISA Kit,48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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