兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
5219 大鼠补体片断5a(C5a)ELISA Kit，48T/96T
5220 人过敏毒素/补体片断4(C4a)ELISA Kit，48T/96T
5221 小鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA Kit，48T/96T
5222 大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA Kit，48T/96T
5223 人黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA Kit，48T/96T
5224 小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA Kit，48T/96T
5225 人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA Kit，48T/96T
5226 豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA Kit，48T/96T
5227 人钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA Kit，48T/96T
5228 小鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA Kit，48T/96T
5229 大鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA Kit，48T/96T
5230 兔钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA Kit，48T/96T
5231 人钩端螺旋体IgM(Lebtospira)ELISA Kit，48T/96T
5232 人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA Kit，48T/96T
5233 人抗弓形体IgG抗体(anti-tox IgG)ELISA Kit，48T/96T
5234 人旋毛虫抗体(Trichinella Ab)ELISA Kit，48T/96T
5235 人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA Kit，48T/96T
5236 人大肠菌素(colicin)ELISA Kit，48T/96T
5237 人军团菌抗原(LP Ag)ELISA Kit，48T/96T
5238 人轮状病毒抗原(RV Ag)ELISA Kit，48T/96T
5239 人血吸虫(schistosoma)ELISA Kit，48T/96T
5240 人抗弓形体IgM抗体(anti-tox IgM)ELISA Kit，48T/96T
5241 人吖啶橙(AO)ELISA Kit，48T/96T
5242 人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA Kit，48T/96T
5243 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA Kit，48T/96T
5244 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA Kit，48T/96T
5245 人抗核仁抗体(ANA)ELISA Kit，48T/96T
5246 人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA Kit，48T/96T
5247 人热休克因子1(HSF-1)ELISA Kit，48T/96T
5248 小鼠热休克因子1(HSF1)ELISA Kit，48T/96T
5249 大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA Kit，48T/96T
5250 人抗核因子抗体(ANF)ELISA Kit，48T/96T
5251 人抗甲型肝炎病毒IgG抗体(anti-HAV)ELISA Kit，48T/96T
5252 羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA Kit，48T/96T
5253 人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA Kit，48T/96T
5254 小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA Kit，48T/96T
5255 猪促生长激素释放激素(GHRH)ELISA Kit，48T/96T
5256 大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA Kit，48T/96T
5257 人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit，48T/96T
5258 小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit，48T/96T
5259 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit，48T/96T
5260 兔抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit，48T/96T
5261 人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(anti-HAV)ELISA Kit，48T/96T
5262 犬促黄体生成激素(LH)ELISA Kit，48T/96T
5263 鸡促黄体激素(LH)ELISA Kit，48T/96T
5264 *(LH)ELISA Kit，48T/96T
5265 小鼠促黄体激素(LH)ELISA Kit，48T/96T
5266 大鼠促黄体激素(LH)ELISA Kit，48T/96T
5267 兔子促黄体激素(LH)ELISA Kit，兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒48T/96T
5268 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA Kit，48T/96T
5269 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA Kit，48T/96T
5270 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA Kit，48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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