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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
4453 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA Kit,48T/96T
4454 兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA Kit,48T/96T
4455 人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA Kit,48T/96T
4456 兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA Kit,48T/96T
4457 人硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA Kit,48T/96T
4458 小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA Kit,48T/96T
4459 大鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA Kit,48T/96T
4460 人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA Kit,48T/96T
4461 小鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA Kit,48T/96T
4462 大鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA Kit,48T/96T
4463 人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit,48T/96T
4464 小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit,48T/96T
4465 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit,48T/96T
4466 兔载脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit,48T/96T
4467 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA Kit,48T/96T
4468 人内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)
4469 小鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)
4470 大鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)
4471 人preptin ELISA Kit,48T/96T
4472 人促睡眠肽(DSIP)ELISA Kit,48T/96T
4473 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA Kit,48T/96T
4474 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA Kit,48T/96T
4475 大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA Kit,48T/96T
4476 人*原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit,48T/96T
4477 兔*原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit,48T/96T
4478 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA Kit,48T/96T
4479 人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA Kit,48T/96T
4480 人CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)ELISA Kit,48T/96T
4481 人β内啡肽受体(β-EPR)ELISA Kit,48T/96T
4482 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA Kit,48T/96T
4483 大鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA Kit,48T/96T
4484 牛乳糖合成酶(LS)ELISA Kit,48T/96T
4485 牛葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)ELISA Kit,48T/96T
4486 牛磷酸果糖激酶(PFK)ELISA Kit,48T/96T
4487 牛柠檬酸合成酶(CS)ELISA Kit,48T/96T
4488 豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA Kit,48T/96T
4489 人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA Kit,48T/96T
4490 小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA Kit,48T/96T
4491 大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA Kit,48T/96T
4492 人C型钠尿肽(CNP)ELISA Kit,48T/96T
4493 小鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA Kit,48T/96T
4494 大鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA Kit,48T/96T
4495 人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA Kit,48T/96T
4496 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA Kit,48T/96T
4497 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA Kit,48T/96T
4498 人尿游离*(UFC)ELISA Kit,48T/96T
4499 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA Kit,48T/96T
4500 人前白蛋白(PA)ELISA Kit,兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒48T/96T
4501 人前列环素(PGI)ELISA Kit,48T/96T
4502 牛淋巴细胞因子ELISA Kit,48T/96T
4503 人淋巴细胞因子ELISA Kit,48T/96T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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