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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
03174 兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α) ELISA试剂盒 rabbit Tumor necrosis factor α,TNFα ELISA Kit 96T/48T
03175 兔子脂联素(ADP)ELISA试剂盒 rabbit adiponectin,ADP ELISA Kit 96T/48T
03176 兔肾素(Renin)ELISA试剂盒 Rabbit Renin ELISA Kit 96T/48T
03177 兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒 rabbit Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit 96T/48T
03178 兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 rabbit Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit 96T/48T
03179 兔子胰岛素(INS)ELISA试剂盒 rabbit Insulin,INS ELISA Kit 96T/48T
03180 兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 Rabbit oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 96T/48T
03181 兔子补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒 Rabbit Complement 4,C4 ELISA Kit 96T/48T
03182 兔子血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 rabbit plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 96T/48T
03183 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒 Rabbit Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T
03184 兔子血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 rabbit plaet activating factor,PAF ELISA Kit 96T/48T
03185 兔子血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒 rabbit thrombomodulin,TM ELISA Kit 96T/48T
03186 兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒 rabbit Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 96T/48T
03187 兔子纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 rabbit plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 96T/48T
03188 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 rabbit plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 96T/48T
03189 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 rabbit intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit 96T/48T
03190 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 Rabbit Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 96T/48T
03191 兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 rabbit intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit 96T/48T
03192 兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 rabbit intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit 96T/48T
03193 兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒 rabbit Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
03194 兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒 rabbit Leptin,LEP ELISA Kit 96T/48T
03195 兔子神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 rabbit neurotrophin 4,NT-4 ELISA Kit 96T/48T
03196 兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒 rabbit neurotrophin 3,NT-3 ELISA Kit 96T/48T
03197 兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒 rabbit Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit 96T/48T
03198 兔子神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 rabbit Nerve growth factor,NGF ELISA Kit 96T/48T
03199 兔子髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Rabbit myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
03200 兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 rabbit Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit 96T/48T
03201 兔子前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒 rabbit Prostaglandin E1,PGE1 ELISA Kit 96T/48T
03202 兔子皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒 rabbit Corticosterone,CORT ELISA Kit 96T/48T
03203 兔子*(Cortisol)ELISA试剂盒 Rabbit Cortisol ELISA Kit 96T/48T
03204 兔子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 rabbit brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit 96T/48T
03205 兔子内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 rabbit Endostatin,ES ELISA Kit 96T/48T
03206 兔子内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 rabbit Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 96T/48T
03207 兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 rabbit Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 96T/48T
03208 兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 rabbit Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
03209 兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 rabbit Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 96T/48T
03210 兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒 Rabbit soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
03211 兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 rabbit Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
03212 兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒 rabbit soluble E-selectin,sE-selectin ELISA Kit 96T/48T
03213 兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒 rabbit macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA Kit 96T/48T
03214 兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒 rabbit basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 96T/48T
03215 兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 96T/48T
03216 兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 rabbit thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
03217 兔子基质金属蛋白酶抑制因子兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒1(TIMP-1)ELISA试剂盒 rabbit tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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