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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
02509 大鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 Rat Inhibin,INH-A ELISA Kit 96T/48T
02510 大鼠绒毛膜*β(β-CG)ELISA试剂盒 Rat Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA Kit 96T/48T
02511 大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit 96T/48T
02512 大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 Rat Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit 96T/48T
02513 大鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒 Rat Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit 96T/48T
02514 大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒 Rat High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 96T/48T
02515 大鼠妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒 Rat pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit 96T/48T
02516 大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 Rat Endothelial lipase,EL ELISA Kit 96T/48T
02517 大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒 Rat carbonic anhydrase,CA ELISA Kit 96T/48T
02518 大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 Rat calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit 96T/48T
02519 大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒 Rat Motilin,MTL ELISA Kit 96T/48T
02520 大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
02521 大鼠*(SS)ELISA试剂盒 Rat Somatostatin,SS ELISA Kit 96T/48T
02522 大鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒 Rat Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T/48T
02523 大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒 Rat skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 96T/48T
02524 大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒 Rat Myosin,MYS ELISA Kit 96T/48T
02525 大鼠结蛋白(Des)ELISA试剂盒 Rat Desmin,Des ELISA Kit 96T/48T
02526 大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒 Rat major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
02527 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒 Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit 96T/48T
02528 大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒 Rat interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 96T/48T
02529 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒 Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit 96T/48T
02530 大鼠抗*Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒 Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
02531 大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒 Rat neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit 96T/48T
02532 大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒 Rat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
02533 大鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒 Rat Gelsolin ELISA Kit 96T/48T
02534 大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 96T/48T
02535 大鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 96T/48T
02536 大鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒 Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit 96T/48T
02537 大鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒 Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit 96T/48T
02538 大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 96T/48T
02539 大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒 Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 96T/48T
02540 大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒 Rat soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit 96T/48T
02541 大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒 Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit 96T/48T
02542 大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒 Rat major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
02543 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒 Rat Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T
02544 大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
02545 大鼠胰高血糖素样肽1(Glp-1)ELISA试剂盒 Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit 96T/48T
02546 大鼠胆囊收缩素/肠促*肽(CCK)ELISA试剂盒 Rat Cholecystokinin,CCK ELISA Kit 96T/48T
02547 大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒 Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA Kit 96T/48T
02548 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒 Rat 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit 96T/48T
02549 大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 Rat apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
02550 大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Rat apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
02551 大鼠25羟基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 96T/48T
02552 大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 Rat N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒 Kit 96T/48T
02553 大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒 Rat Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
02554 大鼠*(VC)ELISA试剂盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit 96T/48T
02555 大鼠*6(VB6)ELISA试剂盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 96T/48T
02556 大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒 Rat Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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