兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
02321 大鼠糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒 Rat glucocorticoid receptor-β,GR-β ELISA Kit 96T/48T
02322 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒 Rat glucocorticoid receptor-α,GR-α ELISA Kit 96T/48T
02323 大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒 Rat Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit 96T/48T
02324 大鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 Rat Hexokinase,HK ELISA Kit 96T/48T
02325 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 Rat glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit 96T/48T
02326 大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 Rat CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit 96T/48T
02327 大鼠高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒 Rat Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit 96T/48T
02328 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 Rat BH3 interacting domain death agonist,Bid ELISA Kit 96T/48T
02329 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 Rat Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit 96T/48T
02330 大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒 Rat Orexin A ELISA Kit 96T/48T
02331 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 Rat Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit 96T/48T
02332 大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 Rat B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 96T/48T
02333 大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒 Rat CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISA Kit 96T/48T
02334 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 Rat neutrophil elastase,NE ELISA Kit 96T/48T
02335 大鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒 Rat Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TGSF ELISA Kit 96T/48T
02336 大鼠羟*(Hyp)ELISA试剂盒 Rat hydroxyproline,Hyp ELISA Kit 96T/48T
02337 大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒 Rat Osteoprotegerin Ligand,OPGL ELISA Kit 96T/48T
02338 大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒 Rat Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit 96T/48T
02339 大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒 Rat anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit 96T/48T
02340 大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒 Rat ferritin,FE ELISA Kit 96T/48T
02341 大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒 Rat carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA Kit 96T/48T
02342 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒 Rat pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit 96T/48T
02343 大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 96T/48T
02344 大鼠抗*(AT)ELISA试剂盒 Rat Anti-trypsin,AT ELISA Kit 96T/48T
02345 大鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒 Rat islet cell antibody,ICA ELISA Kit 96T/48T
02346 大鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 Rat Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit 96T/48T
02347 大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 Rat anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit 96T/48T
02348 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit 96T/48T
02349 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒 Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit 96T/48T
02350 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒 Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit 96T/48T
02351 大鼠纤溶抑制因子/*激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒 Rat Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 96T/48T
02352 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒 Rat plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 96T/48T
02353 大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 Rat free fatty acids,FFA ELISA Kit 96T/48T
02354 大鼠血小板反应蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 96T/48T
02355 大鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 Rat osteonectin,ON ELISA Kit 96T/48T
02356 大鼠*(FA)ELISA试剂盒 Rat Folic acid,FA ELISA Kit 96T/48T
02357 大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 Rat histon-H2b ELISA Kit 96T/48T
02358 大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 Rat N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA Kit 96T/48T
02359 大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒 Rat glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit 96T/48T
02360 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒 Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit 96T/48T
02361 大鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit 96T/48T
02362 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒 Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit 96T/48T
02363 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 Rat Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit 96T/48T
02364 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA 兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒Kit 96T/48T
02365 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Rat myeloperoxidase,MPO ELISA Kit 96T/48T
02366 大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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