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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
02229 大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒 Rat soluble cluster of differentiation 14,sCD14 ELISA Kit 96T/48T
02230 大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒 Rat Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Kit 96T/48T
02231 大鼠雄激素(androgen)ELISA试剂盒 Rat androgen ELISA Kit 96T/48T
02232 大鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒 Rat Toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit 96T/48T
02233 大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA试剂盒 Rat dopamine transporter,DAT ELISA Kit 96T/48T
02234 大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit 96T/48T
02235 大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒 Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T/48T
02236 大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒 Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit 96T/48T
02237 大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 Rat 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit 96T/48T
02238 大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit 96T/48T
02239 大鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒 Rat insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit 96T/48T
02240 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒 Rat Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit 96T/48T
02241 大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)ELISA试剂盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit 96T/48T
02242 大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit 96T/48T
02243 大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit 96T/48T
02244 大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒 Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 96T/48T
02245 大鼠*(UK)ELISA试剂盒 Rat urokinase,UK ELISA Kit 96T/48T
02246 大鼠*Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒 Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit 96T/48T
02247 大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒 Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit 96T/48T
02248 大鼠*Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒 Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit 96T/48T
02249 大鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit 96T/48T
02250 大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit 96T/48T
02251 大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit 96T/48T
02252 大鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒 Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit 96T/48T
02253 大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA试剂盒 Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA Kit 96T/48T
02254 大鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 Rat hepatic lipase,HL ELISA Kit 96T/48T
02255 大鼠烟碱型乙酰*受体(N-AChR)ELISA试剂盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit 96T/48T
02256 大鼠毒蕈碱型乙酰*受体(M-AChR)ELISA试剂盒 Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit 96T/48T
02257 大鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒 Rat activated protein C,APC ELISA Kit 96T/48T
02258 大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒 Rat galanin,GAL ELISA Kit 96T/48T
02259 大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒 Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit 96T/48T
02260 大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒 Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit 96T/48T
02261 大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 96T/48T
02262 大鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA试剂盒 Rat Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 96T/48T
02263 大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒 Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit 96T/48T
02264 大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒 Rat Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit 96T/48T
02265 大鼠细胞色素P450(CYP450)ELISA试剂盒 Rat cytochrome P450,CYP450 ELISA Kit 96T/48T
02266 大鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 Rat growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 96T/48T
02267 大鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit 96T/48T
02268 大鼠溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA试剂盒 Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit 96T/48T
02269 大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T
02270 大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA试剂盒兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒 Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit 96T/48T
02271 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒 Rat α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit 96T/48T
02272 大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 Rat monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 96T/48T
02273 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 Rat peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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