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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
01859 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒 Mouse plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 96T/48T
01860 小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit 96T/48T
01861 小鼠血小板反应蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 Mouse thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 96T/48T
01862 小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 Mouse osteonectin,ON ELISA Kit 96T/48T
01863 小鼠*(FA)ELISA试剂盒 Mouse Folic acid,FA ELISA Kit 96T/48T
01864 小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 Mouse histon-H2b ELISA Kit 96T/48T
01865 小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
01866 小鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒 Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit 96T/48T
01867 小鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒 Mouse Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit 96T/48T
01868 小鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒 Mouse Neuroglobin,NGB ELISA Kit 96T/48T
01869 小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit 96T/48T
01870 小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒 Mouse interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit 96T/48T
01871 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 Mouse Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit 96T/48T
01872 小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit 96T/48T
01873 小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒 Mouse alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 96T/48T
01874 小鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Mouse myeloperoxidase,MPO ELISA Kit 96T/48T
01875 小鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒 Mouse granzymes B,Gzms-B ELISA Kit 96T/48T
01876 小鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒 Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 96T/48T
01877 小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒 Mouse granzymes A,Gzms-A ELISA Kit 96T/48T
01878 小鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒 Mouse lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit 96T/48T
01879 小鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA试剂盒 Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 96T/48T
01880 小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒 Mouse terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 96T/48T
01881 小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA试剂盒 Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor,VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit 96T/48T
01882 小鼠补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒 Mouse Complement 4,C4 ELISA Kit 96T/48T
01883 小鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒 Mouse Renin ELISA Kit 96T/48T
01884 小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒 Mouse α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit 96T/48T
01885 小鼠α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒 Mouse α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA Kit 96T/48T
01886 小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒 Mouse Ubiquitin,Ub ELISA Kit 96T/48T
01887 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒 Mouse α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 96T/48T
01888 小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒 Mouse αN-acetylglucosaminidase,αNAG ELISA Kit 96T/48T
01889 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA试剂盒 Mouse α mannosidase,α Manase ELISA Kit 96T/48T
01890 小鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒 Mouse annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit 96T/48T
01891 小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒 Mouse anti-endothelial cell antibody,AECA ELISA Kit 96T/48T
01892 小鼠α羟基丁酸脱氢酶(αHBDH)ELISA试剂盒 Mouse α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,αHBDH ELISA Kit 96T/48T
01893 小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒 Mouse intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit 96T/48T
01894 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 Mouse neutrophil elastase,NE ELISA Kit 96T/48T
01895 小鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒 Mouse Calf intestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISA Kit 96T/48T
01896 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA试剂盒 Mouse α-galactoyl,Gal ELISA Kit 96T/48T
01897 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)ELISA试剂盒 Mouse β-hexosaminidase A,β-Hex A ELISA Kit 96T/48T
01898 小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒 Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit 96T/48T
01899 小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒 Mouse Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 96T/48T
01900 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒 Mouse β-galactosidase,βGAL ELISA Kit 96T/48T
01901 小鼠肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒 Mouse Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 96T/48T
01902 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA试剂盒 Mouse β mannosidase,β Manase ELISA Kit 96T/48T
01903 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒 Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA Kit 96T/48T
01904 小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒兔*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒 Mouse β-Lactamase inhibitors,BLI ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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