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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
01763 小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 96T/48T
01764 小鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit 96T/48T
01765 小鼠溴脱氧核苷*(BrdU)ELISA试剂盒 Mouse Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit 96T/48T
01766 小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 Mouse transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T
01767 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒 Mouse α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit 96T/48T
01768 小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 Mouse monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 96T/48T
01769 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit 96T/48T
01770 小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 Mouse Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 96T/48T
01771 小鼠网膜素(omentin)ELISA试剂盒 Mouse omentin ELISA Kit 96T/48T
01772 小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒 Mouse orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 96T/48T
01773 小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA Kit 96T/48T
01774 小鼠硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA试剂盒 Mouse thioredoxin reductase,TrxR ELISA Kit 96T/48T
01775 小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒 Mouse Thioredoxin,Trx ELISA Kit 96T/48T
01776 小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒 Mouse Collagenase Type II ELISA Kit 96T/48T
01777 小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒 Mouse Collagenase I ELISA Kit 96T/48T
01778 小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒 Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit 96T/48T
01779 小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒 Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 96T/48T
01780 小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISA试剂盒 Mouse calcium channel blockers,CCB ELISA Kit 96T/48T
01781 小鼠*转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒 Mouse Alanine Aminotransferase,ALT/GPT ELISA Kit 96T/48T
01782 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒 Mouse bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit 96T/48T
01783 小鼠*结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒 Mouse Retinol-binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit 96T/48T
01784 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒 Mouse 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit 96T/48T
01785 小鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA试剂盒 Mouse Pentosidine ELISA Kit 96T/48T
01786 小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 96T/48T
01787 小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒 Mouse L-Selectin ELISA Kit 96T/48T
01788 小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 96T/48T
01789 小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒 Mouse Helicobacter pylori IgG,Hp-IgG ELISA Kit 96T/48T
01790 小鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒 Mouse Dopamine D1 receptor,D1R ELISA Kit 96T/48T
01791 小鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒 Mouse adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA Kit 96T/48T
01792 小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒 Mouse Calretinin,CR ELISA Kit 96T/48T
01793 小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒 Mouse Hya]uronate binding protein,HABP ELISA Kit 96T/48T
01794 小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒 Mouse cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 96T/48T
01795 小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒 Mouse Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit 96T/48T
01796 小鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒 Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 96T/48T
01797 小鼠抗利尿激素/血管加压素/*加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒 Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin,ADH/VP/AVP ELISA Kit 96T/48T
01798 小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-*(AcSDKP)ELISA试剂盒 Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 96T/48T
01799 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒 Mouse plaet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit 96T/48T
01800 小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 Mouse Fibronectin,FN ELISA Kit 96T/48T
01801 小鼠FMS样*激酶3(Flt3)ELISA试剂盒 Mouse FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA Kit 96T/48T
01802 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 96T/48T
01803 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA试剂盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit 96T/48T
01804 小鼠白介素16(IL-16)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 16,IL-16 ELISA Kit 96T/48T
01805 小鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 96T/48T
01806 小鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
01807 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 5,IL-5 ELISA Kit 96T/48T
01808 小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 Mouse Laminin,LN ELISA Kit 96T/48T
01809 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒 Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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