兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
01291 人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA试剂盒 human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA Kit 96T/48T
01292 人ras同源物基因家族成员b(RHOB)ELISA试剂盒 human ras homolog gene family,memmber B,RHOB ELISA Kit 96T/48T
01293 人假定蛋白LOC677340 ELISA试剂盒 human hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit 96T/48T
01294 人假定蛋白LOC433328 ELISA试剂盒 human hypothetical protein LOC433328 ELISA Kit 96T/48T
01295 人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)ELISA试剂盒 human myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88 ELISA Kit 96T/48T
01296 人干扰素活化基因205(Ifi205)ELISA试剂盒 human interferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit 96T/48T
01297 人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒 human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4,LILRB4 ELISA Kit 96T/48T
01298 人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA试剂盒 human C-type lectin domain family 4 member e,CLEC4E ELISA Kit 96T/48T
01299 人假定蛋白LOC677168 ELISA试剂盒 human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit 96T/48T
01300 人淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA试剂盒 human lymphocyte antigen 6 complex locus A,Ly6a ELISA Kit 96T/48T
01301 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)ELISA试剂盒 human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1,EAR1 ELISA Kit 96T/48T
01302 人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)ELISA试剂盒 human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit 96T/48T
01303 人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒 human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 ELISA Kit 96T/48T
01304 人类似cDNA顺序BC027382 ELISA试剂盒 human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA Kit 96T/48T
01305 人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA试剂盒 human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA Kit 96T/48T
01306 人REST协阻抑因子3(RCOR3)ELISA试剂盒 human REST corepressor 3,RCOR3 ELISA Kit 96T/48T
01307 人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)ELISA试剂盒 Human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA Kit 96T/48T
01308 人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA试剂盒 Human α1β glycoprotein,α1β-GP ELISA Kit 96T/48T
01309 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)ELISA试剂盒 Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,sTREM-1 ELISA Kit 96T/48T
01310 人肌抑素(MSTN)ELISA试剂盒 Human Myostatin,MSTN ELISA Kit 96T/48T
01311 人黑素瘤衍生*拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒 Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor,MLZE ELISA Kit 96T/48T
01312 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒 Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4,UGT2B4 ELISA Kit 96T/48T
01313 人蛋白磷酸酶1调控/抑制因子亚基1A(PPP1R1A)ELISA试剂盒 Human protein phosphatase 1 regulatory subunit A,PPP1R1A ELISA Kit 96T/48T
01314 人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒 Human ATP-binding cassette transporter G2,ABCG2 ELISA Kit 96T/48T
01315 人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒 Human Guanine nucleotide dissociation Inhibitor,GDI ELISA Kit 96T/48T
01316 人八聚体转录因子(OTF2B)ELISA试剂盒 Human octamer transcription factor 2B,OTF2B ELISA Kit 96T/48T
01317 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 Human octamer transcription factor 2A,OTF2A ELISA Kit 96T/48T
01318 人脱氧尿三磷酸(DUTP)ELISA试剂盒 Human deoxyuridinetriphate,DUTP ELISA Kit 96T/48T
01319 人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒 Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISA Kit 96T/48T
01320 人肽聚糖(PG)ELISA试剂盒 Human peptidoglycan,PG ELISA Kit 96T/48T
01321 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒 Human Lipoarabinomannan,LAM ELISA Kit 96T/48T
01322 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒 Human CpG oligodeoxynucleotide,CpG-ODN ELISA Kit 96T/48T
01323 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒 Human ICE protease-activating factor,IRAP ELISA Kit 96T/48T
01324 人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒 Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA Kit 96T/48T
01325 人蛋白Z(Protein Z)ELISA试剂盒 Human Protein Z ELISA Kit 96T/48T
01326 人蛋白S(Protein S)ELISA试剂盒 Human Protein S ELISA Kit 96T/48T
01327 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒 Human soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit 96T/48T
01328 人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA Kit 96T/48T
01329 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA Kit 96T/48T
01330 人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA Kit 96T/48T
01331 人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒 Human lumican,LUM ELISA Kit 96T/48T
01332 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒 Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit 96T/48T
01333 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒 Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 96T/48T
01334 人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-1,ST1 ELISA Kit 96T/48T
01335 人基质裂解素(ST2)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-2,ST2 ELISA Kit 96T/48T
01336 人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒 Human Stromelysin-3,ST3 ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 兔子D二聚体(D2D)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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