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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
01152 人蛋白*磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒 Human protein tyrosine phosphatase,PTP/PTPase ELISA Kit 96T/48T
01153 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒 Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA Kit 96T/48T
01154 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA试剂盒 Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase ELISA Kit 96T/48T
01155 人*型纤溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA试剂盒 Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA Kit 96T/48T
01156 人果糖1,6二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒 Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA ELISA Kit 96T/48T
01157 人组织蛋白酶D(cath-D)ELISA试剂盒 Human cathepsin D,cath-D ELISA Kit 96T/48T
01158 人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒 Human hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit 96T/48T
01159 人*(PK)ELISA试剂盒 Human pancreatickininogenase,PK ELISA Kit 96T/48T
01160 人乌头酸酶2(ACO-2)ELISA试剂盒 Human aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit 96T/48T
01161 人26S蛋白酶体(26S PSM)ELISA试剂盒 Human 26S proteasome,26S PSM ELISA Kit 96T/48T
01162 人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒 Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 ELISA Kit 96T/48T
01163 人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)ELISA试剂盒 Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISA Kit 96T/48T
01164 人受体*激酶(RTKs)ELISA试剂盒 Human receptor tyrosine kinase,RTKs ELISA Kit 96T/48T
01165 人丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA试剂盒 Human mitogen activited protein kinase,MAPK ELISA Kit 96T/48T
01166 人黏着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒 Human focal adhesion kinase,FAK ELISA Kit 96T/48T
01167 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒 Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA Kit 96T/48T
01168 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
01169 人*酶(Arg)ELISA试剂盒 Human Arginase,Arg ELISA Kit 96T/48T
01170 人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒 Human neutrophilic alkaline phosphatase,NAP ELISA Kit 96T/48T
01171 人间变性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA试剂盒 Human anapastic lymphoma kinase,ALK ELISA Kit 96T/48T
01172 人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)ELISA试剂盒 Human cytokinin MB,CKMB ELISA Kit 96T/48T
01173 人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)ELISA试剂盒 Human myosin light chain kinase,MLCK ELISA Kit 96T/48T
01174 人*硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒 Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISA Kit 96T/48T
01175 人*S转移酶(GSTs)ELISA试剂盒 Human glutathione S-transferases,GSTs ELISA Kit 96T/48T
01176 人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒 Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISA Kit 96T/48T
01177 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 Human secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit 96T/48T
01178 人泛素连接酶(E3/UBPL)ELISA试剂盒 Human E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA Kit 96T/48T
01179 人肥大细胞类*(MCT)ELISA试剂盒 Human mast cell tryptase,MCT ELISA Kit 96T/48T
01180 人多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒 Human dopachrome tautomerase,DT ELISA Kit 96T/48T
01181 人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA试剂盒 Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme,E2/UBCE ELISA Kit 96T/48T
01182 人蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒 Human protein disulfide isomerase,PDI ELISA Kit 96T/48T
01183 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒 Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA Kit 96T/48T
01184 人γ谷氨酰半*合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒 Humanγ-glutamyl systeine synthetase,γ-ECS ELISA Kit 96T/48T
01185 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit 96T/48T
01186 人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 Human Hexokinase,HK ELISA Kit 96T/48T
01187 人丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit 96T/48T
01188 人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 Human glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit 96T/48T
01189 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit 96T/48T
01190 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 Human Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit 96T/48T
01191 人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 Human neutrophil elastase,NE ELISA Kit 96T/48T
01192 人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 Human A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 96T/48T
01193 人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Human myeloperoxidase,MPO ELISA Kit 96T/48T
01194 人牛小肠碱性磷酸酶兔血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒(CIAP)ELISA试剂盒 Human Calf intestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISA Kit 96T/48T
01195 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 Human Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 96T/48T
01196 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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