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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
01009 人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨(1,5-AG)ELISA试剂盒 Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA Kit 96T/48T
01010 人N端中段骨钙素(N-MID-OT)ELISA试剂盒 Human N-MID Osteocalcin,N-MID-OT ELISA Kit 96T/48T
01011 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒 Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 ELISA Kit 96T/48T
01012 人极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA试剂盒 Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA Kit 96T/48T
01013 人低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒 Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISA Kit 96T/48T
01014 人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA试剂盒 Human Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T
01015 人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒 Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 96T/48T
01016 人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒 Human 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA Kit 96T/48T
01017 人*酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit 96T/48T
01018 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 Human Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit 96T/48T
01019 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒 Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit 96T/48T
01020 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒 Human Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit 96T/48T
01021 人吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒 Human pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit 96T/48T
01022 人骨桥素(OPN)ELISA试剂盒 Human Osteopontin,OPN ELISA Kit 96T/48T
01023 人γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒 Human Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit 96T/48T
01024 人P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒 Human substance P receptor,SP-R ELISA Kit 96T/48T
01025 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
01026 人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 Human Endothelial lipase,EL ELISA Kit 96T/48T
01027 人横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒 Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit 96T/48T
01028 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 96T/48T
01029 人25羟基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 96T/48T
01030 人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit 96T/48T
01031 人骨钙素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit 96T/48T
01032 人可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒 Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit 96T/48T
01033 人1,25二羟基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA试剂盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA Kit 96T/48T
01034 人组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 Human histon-H2b ELISA Kit 96T/48T
01035 人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
01036 人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 96T/48T
01037 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Ki 96T/48T
01038 人甘露聚糖结合凝集素相关*蛋白酶(MASP)ELISA试剂盒 Human mannan binding lectin associated serine protease,MASP ELISA Kit 96T/48T
01039 人周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISA试剂盒 Human Cyclin-dependent kinase 7,CDK-7 ELISA Kit 96T/48T
01040 人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒 Human Cyclin-dependent kinase 2,CDK-2 ELISA Kit 96T/48T
01041 人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA试剂盒 Human Cyclin-dependent kinase 1,CDK-1 ELISA Kit 96T/48T
01042 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒 Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
01043 人解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒 Human A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 96T/48T
01044 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒 Human beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit 96T/48T
01045 人*核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA试剂盒 human uridine phosphorylase 1,UPP1 ELISA Kit 96T/48T
01046 人乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒 Human alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit 96T/48T
01047 人乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒 Human aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit 96T/48T
01048 人Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA试剂盒 human Rho family GTPase 1,RND1 ELISA Kit 96T/48T
01049 人受体TNFRSF结合**激酶2(RIPK2)ELISA试剂盒 human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA Kit 96T/48T
01050 人磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA试剂盒 human phospholipid scramblase 1,PLSCR1 ELISA Kit 96T/48T
01051 人3-羟基-3-甲基戊二酰*合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒 human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1,HMGCS1 ELISA Kit 96T/48T
01052 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12(EAR12)ELISA试剂盒 human eosinophil-associated ribonuclease A family member兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 12,EAR12 ELISA Kit 96T/48T
01053 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员3(EAR3)ELISA试剂盒 human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3,EAR3 ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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