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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
00872 人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)ELISA试剂盒 Human anti-scl70 antibody,SCL70/topoⅠELISA Kit 96T/48T
00873 人抗SS-B/La抗体ELISA试剂盒 Human SS-B/La Antibody,ELISA Kit 96T/48T
00874 人落叶型天疱疮抗体(PF)ELISA试剂盒 Human Pemphigus Foliaceus,PF ELISA Kit 96T/48T
00875 人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA试剂盒 Human β2-Glycoprotein 1 antibody IgA,β2-GP1 Ab IgA ELISA Kit 96T/48T
00876 人β2糖蛋白1抗体IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA试剂盒 Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM,β2-GP1 Ab IgM ELISA Kit 96T/48T
00877 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA试剂盒 Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG,β2-GP1 Ab IgG ELISA Kit 96T/48T
00878 人抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒 Human anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit 96T/48T
00879 人抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒 Human anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit 96T/48T
00880 人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒 Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA Kit 96T/48T
00881 人抗高尔基体抗体(AGAA)ELISA试剂盒 Human anti-golgi apparatus antibody,AGAA ELISA Kit 96T/48T
00882 人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)ELISA试剂盒 human S100 calcium binding protein A9/calgranulin B,S100A9 ELISA Kit 96T/48T
00883 人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒 human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A,S100A8 ELISA Kit 96T/48T
00884 人前病毒整合位点1(Pim1)ELISA试剂盒 human proviral integration site 1,Pim1 ELISA Kit 96T/48T
00885 人绿脓杆菌外毒素A(PEA)ELISA试剂盒 Human Pseudomonas Exotoxin A,PEA ELISA Kit 96T/48T
00886 人流感病毒A(FLU A)ELISA试剂盒 Human Influenza viruses A,FLU A ELISA Kit 96T/48T
00887 人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA试剂盒 Human listeriolysin O,LLO ELISA Kit 96T/48T
00888 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA试剂盒 Human hepatitis B virus X Ag,HBxAg ELISA Kit 96T/48T
00889 人腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒 Human adeno-associated virus,AAV ELISA Kit 96T/48T
00890 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA试剂盒 Human hepatitis B virus X interacting protein,HBXIP ELISA Kit 96T/48T
00891 人伤寒抗原(St-Ag)ELISA试剂盒 Human Salmonella typhi antigen,St-Ag ELISA Kit 96T/48T
00892 人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human T-lymphotropicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISA Kit 96T/48T
00893 人麻疹病毒(MV)ELISA试剂盒 Human morbillivirus,MV ELISA Kit 96T/48T
00894 人流行性腮腺炎(EP)ELISA试剂盒 Human epidemic parotitis,EP ELISA Kit 96T/48T
00895 人痢疾内阿米巴抗原ELISA试剂盒 Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit 96T/48T
00896 人莱姆IgG(Lyme-IgG)ELISA试剂盒 Human Lyme IgG ELISA Kit 96T/48T
00897 人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒 Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit 96T/48T
00898 人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒 Human chlamydial protease-like activity factor,CPAF ELISA Kit 96T/48T
00899 人脊髓灰质炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA试剂盒 Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit 96T/48T
00900 人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒 Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit 96T/48T
00901 人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIV IgG )ELISA试剂盒 Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit 96T/48T
00902 人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒 Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit 96T/48T
00903 人肠病毒(Enterovirus)ELISA试剂盒 Human Enterovirus ELISA Kit 96T/48T
00904 人冠状病毒(Coronaviruses IgG)ELISA试剂盒 Human Coronaviruses IgG ELISA Kit 96T/48T
00905 人不耐热肠毒素B亚单位(LTB)ELISA试剂盒 Human heat-labile enterotoxin B subunit,LTB ELISA Kit 96T/48T
00906 人阿米巴(Amebiasis)ELISA试剂盒 Human Amebiasis ELISA Kit 96T/48T
00907 人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒 Human Diphtheria antibody ELISA Kit 96T/48T
00908 人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA试剂盒 Human Cysticercosis antybody,CYT Ab ELISA Kit 96T/48T
00909 人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒 Human Leishimaria antibody ELISA Kit 96T/48T
00910 人瘢痕性天疱疮抗体(CP)ELISA试剂盒 Human cicatricial Pemphigoid,CP ELISA Kit 96T/48T
00911 人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBV preS2Ab)ELISA试剂盒 human hepatitis B virus,HBV preS2Ab ELISA Kit 96T/48T
00912 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA试剂盒 human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit 96T/48T
00913 人输血传播病毒/辛型肝炎病毒兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒((TTV)ELISA试剂盒 human transfusion transmitted virus,TTV ELISA Kit 96T/48T
00914 人*/1-去氨基-8-右旋-*加压素(dDAVP)ELISA试剂盒 Human */1-desamino-8-D-arginine vasopressin,dDAVP ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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