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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
00781 人抗人绒毛膜*抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit 96T/48T
00782 人抗染色体抗体(anti-chromosome Ab)ELISA试剂盒 Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit 96T/48T
00783 人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒 Human anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit 96T/48T
00784 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)ELISA试剂盒 Human anti-gliadin antibody,AGA ELISA Kit 96T/48T
00785 人抗磷脂酰*抗体(APSA)ELISA试剂盒 Human Anti-phosphatidyl serine antibody,APSA ELISA Kit 96T/48T
00786 人抗磷壁酸抗体(TA)ELISA试剂盒 Human anti-teichoic acid antibody,TA ELISA Kit 96T/48T
00787 人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒 Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA Kit 96T/48T
00788 人抗巨噬细胞抗体(anti-macrophage Ab)ELISA试剂盒 Human anti-macrophage antibody ELISA Kit 96T/48T
00789 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit 96T/48T
00790 人抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒 Human anti-red cell antibody ELISA Kit 96T/48T
00791 人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA试剂盒 Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA Kit 96T/48T
00792 人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒 Human anti-nucleolus antibody,ANA ELISA Kit 96T/48T
00793 人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒 Human Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit 96T/48T
00794 人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA试剂盒 Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA Kit 96T/48T
00795 人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)ELISA试剂盒 Human alveoli basement membrane zone antibody,ABM-Ab ELISA Kit 96T/48T
00796 人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)ELISA试剂盒 Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit 96T/48T
00797 人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒 Human epidermal basement membrane zone,EBMZ ELISA Kit 96T/48T
00798 人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒 Human purkinje cell autoantibody,PCA-1/Yo ELISA Kit 96T/48T
00799 人抗Sa抗体(anti-Sa-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-Sa-antibody ELISA Kit 96T/48T
00800 人抗神经元核抗体2型/抗Ri抗体(ANNA-2/Ri)ELISA试剂盒 Human neuronal nuclear autoantibody,ANNA-2/Ri ELISA Kit 96T/48T
00801 人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)ELISA试剂盒 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody,hnRNP/RA33 ELISA Kit 96T/48T
00802 人抗Q热抗体(anti-Q-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-Q fever antibody,anti-Q-Ab ELISA Kit 96T/48T
00803 人抗多发性肌炎硬皮病抗体(PM-Scl/PM-1)ELISA试剂盒 Human polymyositis-sclerosis antibody,PM-Scl/PM-1 ELISA Kit 96T/48T
00804 人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA试剂盒 Human anti-PL7-antibody ELISA Kit 96T/48T
00805 人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒 Human anti-PL12-antibody,PL12/AlaRS ELISA Kit 96T/48T
00806 人抗Mi2抗体(anti-Mi2-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-Mi2-antibody ELISA Kit 96T/48T
00807 人抗Ku抗体(anti-Ku-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-Ku-antibody ELISA Kit 96T/48T
00808 人抗IgA抗体(anti-IgA-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-IgA antibody ELISA Kit 96T/48T
00809 人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)ELISA试剂盒 Human neuronal nuclear autoantibody,ANNA-1/Hu ELISA Kit 96T/48T
00810 人抗DNA酶B抗体(anti-DNase B)ELISA试剂盒 Human anti-deoxyribonuclease B,anti-DNase B ELISA Kit 96T/48T
00811 人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-Bullous Pemphigoid 180 antibody,BP180-Ab ELISA Kit 96T/48T
00812 人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒 Human anti-B burgdorleri antibody,BB-Ab ELISA Kit 96T/48T
00813 人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒 Human Anti-smooth muscle antibody,ASMA ELISA Kit 96T/48T
00814 人抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA试剂盒 Human anti-liver cell membrane antibody,LMA ELISA Kit 96T/48T
00815 人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA试剂盒 Human liver specific lipoprotein,LSP ELISA Kit 96T/48T
00816 人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA试剂盒 Human eye muscle antibody,EMAb ELISA Kit 96T/48T
00817 人抗补体1q抗体(C1q)ELISA试剂盒 Human Anti-Complement 1q antibody,C1q ELISA Kit 96T/48T
00818 人抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒 Human intrinsic factor antibody,IFA ELISA Kit 96T/48T
00819 人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒 Human anti-phospholipid antibody,Apl/APA ELISA Kit 96T/48T
00820 人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒 Human anti-Histone antibody,AHA ELISA Kit 96T/48T
00821 人晶体蛋白α(Cryα)ELISA试剂盒 Human crystal proteins α,Cryα ELISA Kit 96T/48T
00822 人晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒 Human crystal proteins β,Cryβ ELISA Kit 96T/48T
00823 人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA试剂盒兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 Human Collagen autoantibody,CLA ELISA Kit 96T/48T
00824 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒 Human anti-filaggrin antibody,AFA ELISA Kit 96T/48T
00825 人抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒 Human Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit 96T/48T
00826 人抗肝肾微粒体抗体(LKM)ELISA试剂盒 Human liver kidney microsome autoantibody,LKM ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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