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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
00465 人*(TM)ELISA试剂盒 Human Thrombin,TM ELISA Kit 96T/48T
00466 人*Ⅶ(FⅦ)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit 96T/48T
00467 人*原(PT)ELISA试剂盒 Human Prothrombin,PT ELISA Kit 96T/48T
00468 人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒 Human C4 binding protein,C4BP ELISA Kit 96T/48T
00469 人补体片段3c(C3c)ELISA试剂盒 Human Complement fragment 3c,C3c ELISA Kit 96T/48T
00470 人补体7(C7)ELISA试剂盒 Human Complement 7,C7 ELISA Kit 96T/48T
00471 人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T 96T/48T
00472 人chemerin ELISA试剂盒 Human chemerin ELISA Kit 96T/48T
00473 人*Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit 96T/48T
00474 人类白细胞抗原E(HLA-E)ELISA试剂盒 Human leukocyte antigen E,HLA-E ELISA Kit 96T/48T
00475 人类白细胞抗原A(HLA-A)ELISA试剂盒 Human leukocyte antigen A,HLA-A ELISA Kit 96T/48T
00476 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 Human Serum amyloid P,SAP ELISA Kit 96T/48T
00477 人活化蛋白C(APC) ELISA试剂盒 Human activated protein C,APC ELISA Kit 96T/48T
00478 人蛋白C(Protein C)ELISA试剂盒 Human Protein C ELISA Kit 96T/48T
00479 人血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒 Human plaet factor 3, PF3 ELISA Kit 96T/48T
00480 人*原片段F1+2(F1+2)ELISA Human prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit 96T/48T
00481 人血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒 Human Hemoglobin C,HbC ELISA Kit 96T/48T
00482 人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒 Human Fibrin ELISA Kit 96T/48T
00483 人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒 Human fibrinopeptide B,FPB ELISA Kit 96T/48T
00484 人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒 Human plasminogen activator,PLGA ELISA Kit 96T/48T
00485 人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒 Human Surface Membrane Immunoglobulin,SmIg ELISA Kit 96T/48T
00486 人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒 Human prealbumin,PA ELISA Kit 96T/48T
00487 人类白细胞抗原G(HLA-G)ELISA试剂盒 Human leukocyte antigen G,HLA-G ELISA Kit 96T/48T
00488 人补体片断3b(C3b)ELISA试剂盒 Human Complement fragment 3b,C3b ELISA Kit 96T/48T
00489 人游离蛋白S(FP-S)ELISA试剂盒 Human Free Protein S,FP-S ELISA Kit 96T/48T
00490 人纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒 Human Plasminogen,Plg ELISA Kit 96T/48T
00491 人血清白蛋白(HSA)ELISA试剂盒 Human sreum albumin,HSA ELISA Kit 96T/48T
00492 人血小板反应蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 96T/48T
00493 人补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒 Human Complement 4,C4 ELISA Kit 96T/48T
00494 人补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒 Human Complement 3,C3 ELISA Kit 96T/48T
00495 人*Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit 96T/48T
00496 人类白细胞抗原B27(HLA-B27)ELISA试剂盒 Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit 96T/48T
00497 人*Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒 Human coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA Kit 96T/48T
00498 人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 Human apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
00499 人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
00500 人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 96T/48T
00501 *A(IgA)ELISA试剂盒 Human Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 96T/48T
00502 *G(IgG)ELISA试剂盒 Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 96T/48T
00503 *M(IgM)ELISA试剂盒 Human Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 96T/48T
00504 人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 96T/48T
00505 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 96T/48T
00506 人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒 Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒 Kit 96T/48T
00507 人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒 Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 96T/48T
00508 人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 Human plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit 96T/48T
00509 人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 Human plaet activating factor,PAF ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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