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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
00324 人*(GSH)ELISA试剂盒 Human glutathione,GSH ELISA Kit 96T/48T
00325 人17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒 Human 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 96T/48T
00326 人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 Human 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 96T/48T
00327 人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 Human Cathepsin K,cath-K ELISA Kit 96T/48T
00328 人骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒 Human bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit 96T/48T
00329 人血凝素(HA)ELISA试剂盒 Human hemagglutinin,HA ELISA Kit 96T/48T
00330 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒 Human adipose differentiation-related protein,ADRP ELISA Kit 96T/48T
00331 人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 Human Caldesmon,CALD ELISA Kit 96T/48T
00332 人钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒 Human calcineurin,CaN ELISA Kit 96T/48T
00333 人低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA Kit 96T/48T
00334 人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒 Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit 96T/48T
00335 人*(CTX)ELISA试剂盒 Human Cyclophosphamide,CTX ELISA Kit 96T/48T
00336 人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒 Human Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit 96T/48T
00337 人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA试剂盒 Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit 96T/48T
00338 人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒 Human High density lipoprotein,HDL ELISA Kit 96T/48T
00339 人α*S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒 Human α-glutathione S-transferases,α-GST ELISA Kit 96T/48T
00340 人同型半*(Hcy)ELISA试剂盒 Human Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit 96T/48T
00341 人游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 Human free fatty acids,FFA ELISA Kit 96T/48T
00342 人骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 Human osteonectin,ON ELISA Kit 96T/48T
00343 人*(FA)ELISA试剂盒 Human Folic acid,FA ELISA Kit 96T/48T
00344 人内毒素(ET)ELISA试剂盒 Human endotoxin,ET ELISA Kit 96T/48T
00345 人*A(CsA)ELISA试剂盒 Human Cyclosporine A,CsA ELISA Kit 96T/48T
00346 人白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒 Human Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit 96T/48T
00347 人*(Cyt-C)ELISA试剂盒 Human Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit 96T/48T
00348 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 Human lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit 96T/48T
00349 人脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 Human lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit 96T/48T
00350 人骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒 Human Crosslaps,Cr ELISA Kit 96T/48T
00351 人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒 Human cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit 96T/48T
00352 人脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒 Human deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 96T/48T
00353 人环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit 96T/48T
00354 人白三烯B4(LTB4) ELISA试剂盒 Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit 96T/48T
00355 人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit 96T/48T
00356 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 96T/48T
00357 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA Kit 96T/48T
00358 人脂联素(ADP)ELISA试剂盒 Human adiponectin,ADP ELISA Kit 96T/48T
00359 人组胺(HIS)ELISA试剂盒 human Histamine,HIS ELISA Kit 96T/48T
00360 人抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒 human Resistin ELISA Kit 96T/48T
00361 人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 Human Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit 96T/48T
00362 人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit 96T/48T
00363 人*(cAMP)ELISA试剂盒 Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit 96T/48T
00364 人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒 Human Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 96T/48T
00365 人*(AP)ELISA试剂盒 Human Aprotinin,AP ELISA Kit 96T/48T
00366 人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒 Human matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISA Kit 兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒96T/48T
00367 人磷酯酶C(PLC)ELISA试剂盒 Human Phospholipase C,PLC ELISA Kit 96T/48T
00368 人*蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒 Human serine protease,PRSS ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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