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上海纪宁酶联科技有限公司
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兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
00229 人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV)ELISA试剂盒 Human anti-respiratory syncytial virus antibody,RSV ELISA Kit 96T/48T
00230 人麻疹病毒IgM(MV IgM)ELISA试剂盒 Human measlesvirus IgM,MV IgM ELISA Kit 96T/48T
00231 人柯萨奇病毒IgM(Cox V-IgM)ELISA试剂盒 Human Coxsackie virus IgM,Cox V-IgM ELISA Kit 96T/48T
00232 人柯萨奇病毒IgG(Cox V-IgG)ELISA试剂盒 Human Coxsackie virus IgG,Cox V-IgG ELISA Kit 96T/48T
00233 人结核菌杆抗体IgG(TB-Ab IgG)ELISA试剂盒 Human tuberculosis antibody IgG,TB-Ab IgG ELISA Kit 96T/48T
00234 人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA试剂盒 Human Hepatitis G virus IgG,HGV-IgG ELISA Kit 96T/48T
00235 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA试剂盒 Human Hepatitis D virus IgM,HDV IgM ELISA Kit 96T/48T
00236 人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒 human hepatitis E virus IgG,HEV-IgG ELISA Kit 96T/48T
00237 人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA试剂盒 Human Hepatitis D virus IgM,HDV IgM ELISA Kit 96T/48T
00238 人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA试剂盒 human Hepatitis D virus IgG,HDV IgG ELISA Kit 96T/48T
00239 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA试剂盒 Human Hepatitis C virus IgM,HCV-IgM ELISA Kit 96T/48T
00240 人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA试剂盒 Human Hepatitis C virus IgG,HCV-IgG ELISA Kit 96T/48T
00241 人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒 Human glucoprotein 130,gp130 ELISA Kit 96T/48T
00242 人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒 Human corticotropin-releasing factor,CRF 96T/48T
00243 人睾酮受体(TR)ELISA试剂盒 Human Testoterone recepter,TR ELISA Kit 96T/48T
00244 人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒 human glycoprotein 49A,Gp49a ELISA Kit 96T/48T
00245 人抑制素β-B(Inhbb)ELISA试剂盒 human inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit 96T/48T
00246 人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 96T/48T
00247 人钙调素(CAM)ELISA试剂盒 Human calmodulin,CAM ELISA Kit 96T/48T
00248 人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒 Human Procalcitonin,PCT ELISA Kit 96T/48T
00249 人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA试剂盒 Human Growth Hormone Binding Protein,GHBP ELISA Kit 96T/48T
00250 人肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 Human adrenomedullin,ADM ELISA Kit 96T/48T
00251 人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒 Human Immunoreactive growth hormone,irGH ELISA Kit 96T/48T
00252 人雌激素受体(ER)ELISA试剂盒 Human Estrogen Receptor,ER ELISA Kit 96T/48T
00253 人糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒 Human glucocorticoid receptor-β,GR-β ELISA Kit 96T/48T
00254 人糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒 Human glucocorticoid receptor-α,GR-α ELISA Kit 96T/48T
00255 人高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit 96T/48T
00256 人黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit 96T/48T
00257 人8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit 96T/48T
00258 人肾素(Renin)ELISA试剂盒 Human Renin ELISA Kit 96T/48T
00259 人肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒 Human Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 96T/48T
00260 人雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒 Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit 96T/48T
00261 人血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 Human angiotensinogen,aGT ELISA Kit 96T/48T
00262 人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit 96T/48T
00263 人卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒 Human Follistatin,FS ELISA Kit 96T/48T
00264 人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 Human catecholamine,CA ELISA Kit 96T/48T
00265 人乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 Human acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 96T/48T
00266 人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒 Human 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit 96T/48T
00267 人抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 Human Inhibin,INH-A ELISA Kit 96T/48T
00268 人*(SS)ELISA试剂盒 Human Somatostatin,SS ELISA Kit 96T/48T
00269 人生长激素释放多肽(GHRP) ELISA试剂盒 Human Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
00270 人抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒 Human inhibin B,INH-B ELISA Kit 96T/48T
00271 人促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒96T/48T
00272 人褪黑素(MT)ELISA试剂盒 Human Melatonin,MT ELISA Kit 96T/48T
00273 人血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒 Human Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit 96T/48T
00274 人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒 Human Corticosterone,CORT ELISA Kit 96T/48T
00275 人前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit 96T/48T
00276 人双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒 Human Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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