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上海纪宁酶联科技有限公司
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阅读:283发布时间:2014-10-14
牛γ干扰素(IFN-γ)样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
牛γ干扰素(IFN-γ操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200ng/L,800ng/L ,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
E-(Bo)(01)-00006 牛巨噬细胞趋化因子(MCF)ELISA试剂盒 ,英文名: macrophage chemotatic factor,MCF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00007 牛α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒 ,英文名: Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00008 牛B细胞生长因子(BCGF)ELISA试剂盒 ,英文名: B cell growth protein,BCGF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00009 牛B细胞分化因子(BCDF)ELISA试剂盒 ,英文名: B cell differetiation factor,BCDF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00010 牛可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 ,英文名: soluble adhesion molecules,Sam ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00011 牛穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 ,英文名: Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00012 牛多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒 ,英文名: pleiotrophin,PTN ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00013 牛淋巴细胞因子ELISA试剂盒 ,英文名: lymphocyte factor ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00014 牛神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒 ,英文名: Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00015 牛可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒 ,英文名: soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00016 牛可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒 ,英文名: soluble cytokine receptor,sCKR ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00017 牛集落刺激因子(CSF)ELISA试剂盒 ,英文名: colony-stimulating factor,CSF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00018 牛凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒 ,英文名: apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00019 牛P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)ELISA试剂盒 ,英文名: Placenta Cadherin,P-cad ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00020 牛角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒 ,英文名: KeRatinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit ,规格: 96T/48T
E-(Bo)(01)-00021 牛血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒 ,英文名: Plaet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit ,规格: 96T/48T
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