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上海纪宁酶联科技有限公司
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阅读:243发布时间:2015-8-10
根据试剂的来源和样本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。ELISA试剂盒以下主要介绍几种公司常用的检测抗原的类型:
样本中的待测药物和固相化的抗原共同竞争一定量的抗体,加入酶标记抗抗体(酶标二抗)后能与固相化的抗原抗体复合物特异性结合,经底物显色后检测,样本中药物含量愈高,竞争结合的抗体量愈多,从而结合在固相上的酶标记抗抗体(酶标二抗)量愈少,zui后的显色也愈浅。本公司及国内产品多用此法。
具体操作步骤如下:
1)抗原固相化:将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加入标准品/样本,再加入抗体,保温反应。ELISA试剂盒样本中药物与固相抗原同时竞争与特异性抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去游离物质及吸附在固相载体上结合不紧密的物质。
3)加酶标抗抗体,固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检药物的量负相关。
4)加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物。ELISA试剂盒通过仪器检测分析,测知样本中抗原的量。
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