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上海抚生实业有限公司
DISC1 N端抗体经过*实践已经发展的相当成熟,在免疫学诊断中的应用也相当广泛。
DISC1 N端抗体动物体内单抗的方法迄今为止,通常情况下均采用动物体内单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得,因此使用的动物当然*BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,在小鼠腹腔内生长杂交瘤,并产生腹水,因而可得到大量的腹水单抗且抗体浓度很高。可见该法操作简便、经济,不过,腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险,故而用SPF级小鼠。DISC1 N端抗体
A、材料:a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷(Pristane)或液体石蜡。c. 处于对数生*的杂交瘤细胞。
B、方法:a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡,每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞,每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后,每天观察小鼠腹水产生情况,如腹部明显膨大,以手触摸时,皮肤有紧张感,即可用16号针头采集腹水,一般可连续采2-3次,通常每只小鼠可采5-10ml腹水;d. 将腹水离心(2000r/min 5分钟),除去细胞成分和其他的沉淀物,收集上清,测定抗体效价,分装,-70℃冻存备用,或冻干保存。
公司产品详情请参阅有关详细论述链接点击:Mouse Interleukin 1,IL-1 小鼠白介素1(IL-1)
Mouse Interleukin 1β,IL-1β 小鼠白介素1β (IL-1β)
Mouse Myoglobin,MYO/MB 小鼠肌红蛋白(MYO/MB)
Mouse Thromboxane B2,TXB2 小鼠血栓素B2(TXB2)
Mouse acetylcholine,ACH 小鼠乙酰*(ACH)
Mouse Leukotriene B4,LT-B4 小鼠白三烯B4(LTB4)
Mouse leukemia inhibitory factor receptor,LIFR 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)
Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb 大鼠活化素A受体抗体(ACV-RAb)
Rat Neuroglobin,NGB 大鼠脑红蛋白(NGB)
Rat Thrombopoietin,TPO 大鼠血小板生成素(TPO)
Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)
Rat Bcl-2 associated X protein,Bax 大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)
Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL 大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)
Rat Interleukin-7,IL-7 大鼠白介素7(IL-7)
(2) 体外培养单抗的方法总体上讲,杂交瘤细胞系并不是严格的贴壁依赖细胞(anchorage dependent cell,ADC),因此既可以进行单层细胞培养,又可以进行悬浮培养。杂交瘤细胞的单层细胞培养法是各个实验室zui常用的手段,即将杂交瘤细胞加入培养瓶中,以含10-15%小牛血清的培养基培养,细胞浓度以1×106-2×106/ml为佳,然后收集培养上清,其中单抗含量约10-50ug/ml。显然,这种方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。
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