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马铃薯X病毒(PVX)ELISA试剂盒操作步骤

阅读:171发布时间:2019-03-26

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马铃薯X病毒(PVX)ELISA试剂盒操作步骤:

编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用

洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

温育:操作同3。

洗涤:操作同5。

显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟

终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
 

马铃薯X病毒(PVX)ELISA试剂盒保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

 


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