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上海抚生实业有限公司
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阅读:114发布时间:2018-04-02
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进口ELISA试剂盒价格实验中出现的问题
1. 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3. 吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4. 要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5. 样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
解决办法:
1 挑选试剂挑选质量的检测试剂,严厉依照试剂阐明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样可能原因:1)血清或血浆标本分离欠好即进行加样;2)手工操作中,加样板过多形成加样后放入孵箱前等待时刻过长;3)加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。解决办法:1)标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管,采血后有必要当即颠倒*混合5-10次,放置一段时刻后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要储存,则置于-20℃的低温冰箱内。2)加样后及时放入孵箱。3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。4)如果选用AT或其他全自动加样,挑选FAME或其他后处理仪器加酶试剂。5)标本较多时,请分批操作。
3 孵育可能原因:1)孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸腾,吸附于孔壁,难于清洗*;2)孵育时刻人为延伸,导致非特异性结合紧附于反响孔周围,难以清洗*。解决办法:1)贴封片或加盖;2)按阐明步骤严厉控制操作时刻。
4 洗板可能原因:1)选用手工洗板,孔与孔之间液体穿插。2)选用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针阻塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板作用差。3)反响板过多形成洗板等待时刻长。解决办法:1)确保洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸上轻轻拍干;2)合理安排,或多用几台洗板机。
5 显色可能原因:1)显色剂后放置时刻过长或运用过期显色剂;2)加显色剂时溅起孔外形成液体回流。解决办法:1)显色剂尽量在临用前,坚持不期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必;2)加样时坚持显色剂不外流;3)A、B液应防止触摸金属器械。
6 停止可能原因如加停止液时发生较多气泡,导致假阳性添加。所以在加停止液时应防止发生气泡。
7 读板如读板时板底不清洁等。应确保酶标板清洁。
所以在整个操作过程中确保酶标板不触摸次氯酸;尽可能完成ELISA试剂盒检测规范自动化,有效进步检测质量。
在实际操作中,除了挑选试剂外,有必要严厉依照操作步骤进行操作,一起作好室内质控、室间质评,以谨慎的工作作风检测每一份标本,才干确保检测质量。现在国内已有适当数量的单位具有全自动酶标仪,这关于完成ELISA规范化检测、进步检测质量起到了重要作用。
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