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进口ELISA试剂盒价格实验操作步骤解析

阅读:94发布时间:2018-01-22

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进口ELISA试剂盒价格实验操作步骤解析
一、样品的保存
用于ELSIA检测的样本非常广泛,包括各种动物组织、动物体液以及其他食品提取物等。有些样本可以直接通过简单离心、稀释,有些则需要经过理化方法进行提取。检测样品应保证新鲜,经前处理的提取液应及时进行检测,时间越长,提取液中的抗原的效价越低。如不及时检测,应及时放4℃冰箱保存。防止细菌污染,因菌体中可能含有内源性HRP,可能会导致假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的HRP可能发生聚合,在间接法ELSIA检测中可使本底加深。所以标本如需保存做多次检测,宜采用少量分装冰箱保存。组织样本若不及时做处理,应该放置-15℃冰箱保存。
二、试剂的准备
严格按照试剂盒的说明书的要求准备好需要用到的试剂。LEISA检测中应采用蒸馏水或者去离子水,洗涤用水应新鲜和高质量,注意查看是否需要和洗涤液进行稀释。自配的缓冲液应用PH计测量校正。从冰箱取出的试剂必须与室温平衡方可使用。试剂盒中本次试验不需要的试剂部分及时放回冰箱保存。三、加样
在ELSIA加样步骤中,应加所加物加到ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般使用微量加样器,按规定的量加入孔板中。每次加标本必须更换枪头,以免交叉污染。加酶标记物和底物液时可用定量多道加样器,使加样过程迅速完成。
四、温育
温育的方式一般采用水浴,可将酶标板置于水浴箱中,酶标板底贴着水面,是温度迅速平衡。为避免蒸发,酶标板上应加盖,也可用塑料贴封或者保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若保温箱,酶标板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性能良好的材料或者如金属等,在盒底垫湿的纱布,将酶标板放在纱布上。这样能保证稳定迅速平衡。无论水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温要严格限制在室温的范围内,标准室温温度是指20℃-25℃,具体的操作时间根据说明书的要求严格控制温育。
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