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上海抚生实业有限公司
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阅读:94发布时间:2018-01-05
上海抚生实业有限公司
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进口ELISA试剂盒价格实验应了解的安全知识:
1、不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
2、避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
3、实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
4、不用的其它试剂盒应包装好或盖好,不同批号的试剂盒不要混用,保质期前使用。
5、应按标签说明书储存,使用前恢复到室温,稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
6、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
7、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
60μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
30μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
15μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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