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上海抚生实业有限公司
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阅读:138发布时间:2014-07-16
上海抚生实业有限公司
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小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。还有有的包被原可能不是蛋白,对于*和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被,ELISA试剂盒亲和素*:先亲和素先包被载体,加入*化的DNA,这种包被方法平均、牢固,已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
应用到科研出产中zui为敏捷的技术手段。自己也为此苦恼过很长一段时间,跟着自己技术水平得进步,或多或少地也把握了ELISA试剂盒体系的脾气,也是熟能生巧吧,现在做方阵,做ELISA试剂盒已是轻车熟路了,以前检测一种抗体用整整一下战书还算得晕晕的,现在给我十个八个的从包被到显色,一个工作日基本搞定。
ELISA试剂盒可是在新老手操纵过程中老是会泛起或大或小的题目,本人在刚开始做ELISA试剂盒时就面对良多灾题,固然有师兄师姐铺路,但仍是经常做得乌烟瘴气,好比说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空缺还低。包被原的性质很重要,蛋白浓度,是否降解,这关系到你做出的抗体可不可以被其识别,所以保留抗原很重要,我做重组蛋白时,ELISA试剂盒师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。
封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲,从而排斥ELISA试剂盒后的步骤中干扰物质的再吸附。但有时因为试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。ELISA试剂盒这种物理吸附长短特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。
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